18-24章螺旋体等及真菌(检验)(1).ppt

第十八章 螺旋体(Spirochete) ——是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物。 介于细菌和原虫之间 第一节 分类与命名 分类： 螺旋体目 螺旋体科 八个属（Ⅰ~Ⅷ） Ⅰ，Ⅴ，Ⅷ三个属为致病性螺旋体 疏螺旋体属（Ⅰ）：螺旋3~10个，稀疏、粗、浅，不规则。 如：奋森疏螺旋体 密螺旋体属（ Ⅷ ）：螺旋8~14个、细密、深、规则、两端尖直。 如：梅毒螺旋体 钩端螺旋体属（Ⅴ）：螺旋细密、规则，两端或一端呈钩状。 如：问号状钩端螺旋体 第二节 钩端螺旋体(Leptospira) 问号钩端螺旋体：致病 双曲钩端螺旋体：无致病性 一、临床意义 1. 致病物质： 内毒素样物质（ELS）/脂多糖样物质（LLS) 溶血素 细胞毒性因子（GTF） 细胞致病作用物质 2. 所致疾病 钩体病（打谷黄），自然疫源性疾病，人畜共患病 传染源和储存宿主：鼠类、幼猪 传播途径：皮肤粘膜接触疫水、胎盘、消化道、吸血昆虫 易感人群：农民、饲养员、矿工 临床表现 寒热酸痛一身软， 眼红腿痛淋巴大。 （尤其是腓肠肌压痛明显） 二、生物学特性 ⒈形态染色： ⑴具有细密而规则的螺旋，菌体一端或两端弯曲成钩状 ⑵ Fontana镀银染色：棕褐色 图 ⑶电子显微镜：轴丝，“内鞭毛” ⑷暗视野显微镜：观察活标本可见运动 ⒉抗原构造 属特异性抗原 群特异性抗原 型特异性抗原 显微镜凝集试验（ＭＡＴ） 凝集素吸收试验（ＡＡＴ） ⒊基因组 ⒋培养特性 营养要求高； 常用Korthof培养基（柯索夫培养基），生长缓慢； 最适温度为28～30℃；最适pH为7.2~7.6； 在液体培养基中呈半透明云雾状生长； 在固体培养基中形成透明、不规则、直径约2mm的 扁平菌落。 ⒌抵抗力：在自然界存活力强 耐潮湿、耐碱（NaHCO3碱化尿液）； 对热敏感； 对普通化学消毒剂敏感； 对青霉素敏感。 三、微生物学检验 （一）检验程序 见图18-2 （二）标本采集： 第一周内取血 第二周取尿液或脑脊液 （三）标本直接检查 1. 直接显微镜检查 暗视野显微镜检查 普通光镜检查（Fontana镀银染色） 直接免疫荧光法检查 2. 核酸检查：PCR、特异DNA探针法 （四）分离培养及鉴定 Korthof培养基 暗视野检查、镀银染色，血清学鉴定。 （五）抗体检测 1. 显微镜凝集试验（凝集溶解）： 已知钩体+血清 小蜘蛛样凝集 血清中补体含量高 凝集稍后溶解 效价＞1:300， 取双份血清，抗体效价呈4倍增高 2. 间接凝集试验： 已知钩体+炭粒（乳胶）+待测血清 结果 炭粒(1:8)；乳胶(1:2) 3. 酶联免疫吸附试验 （六）动物试验：标本豚鼠腹腔接种 1. 3~5d 腹腔抽取液暗视野 2. 3~6天 取心脏血检查及分离培养 3.死亡动物解剖： 第三节 密螺旋体属 ——梅毒螺旋体(T.pallidum,TP) 一、临床意义 （一）致病物质 外膜蛋白：粘附作用 荚膜样物质：表面粘多糖和唾液酸 透明质酸酶 ㈡所致疾病 1、传染源和宿主都是人 2、传播途径： 先天梅毒：胎盘 后天梅毒：性接触 3、疾病特点： （1）后天梅毒（获得性梅毒）： 分为三期： Ⅰ期梅毒（初期，初疮）——无痛性硬下疳，病灶中有大量螺旋体，传染性极强，可4~8周自然愈合， Ab（+/-），活检（+）图 Ⅱ期梅毒（中期）——硬下疳后2~8周全身皮肤粘膜梅毒疹，淋巴结肿大，有螺旋体，传染性极强，此期可反复，Ab（+），活检（+） 图 Ⅲ期梅毒（晚期）——累及全身，基本损害为慢性肉芽肿，大片溃疡，梅毒瘤，危及生命，无螺旋体，传染性小，Ab（+），活检（-）图 ⑵先天梅毒 （胎传梅毒） 经胎盘进入胎儿所致 多发生于妊娠4个月之后 表现：流产、早产、死胎、先天畸形（马鞍鼻、锯齿形牙、间质性角膜炎、神经性耳聋） 二、生物学特性 1、形态与染色：图 8~14个致密规则的螺旋，两端尖直，运动活泼，Fontana镀银染色呈棕褐色 2、培养：尚未成功（人工无生命培养基） 3、抵抗力：极弱 对温度敏感，50℃ 5min,4 ℃ 3天死亡； 对干燥敏感； 对肥皂、青霉素敏感。 三、微生物学检验 1、检验程序 见图18-5 2、标本采集 分泌物、渗出液、穿刺液、组织块 Ⅰ期梅毒取下疳分泌物 Ⅱ期梅毒取梅毒疹渗出液或淋巴结穿刺液 先天性梅毒：脐血 3、标本直接检查 直接显微镜检查 核酸检测 4、体外培养 5、抗