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RNAi基因沉默机制课件教案.pptVIP

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RNAi基因沉默机制 RNAi的定义 目前对RNAi (RNA interference)的定义有很多种,不同的资料对其定义的侧重点也不尽相同,如果将RNAi看作一种生物学现象,可以有以下定义: ① RNAi是由dsRNA介导的由特定酶参与的特异性基因沉默现象,它在转录水平、转录后水平和翻译水平上阻断基因的表达。 ② RNAi是有dsRNA参与指导的,以外源和内源mRNA为降解目标的转基因沉默现象。具有核苷酸序列特异性的自我防御机制,是一种当外源基因导入或病毒入侵后,细胞中与转基因或入侵病毒RNA同源的基因发生共同基因沉默的现象。 RNAi的定义 如果将其作为一门生物技术,则定义为 : ① RNAi 是指通过反义RNA与正链RNA 形成双链RNA 特异性地抑制靶基因的现象,它通过人为地引入与内源靶基因具有相同序列的双链RNA(有义RNA 和反义RNA) ,从而诱导内源靶基因的mRNA 降解,达到阻止基因表达的目的。 ② RNAi是指体外人工合成的或体内的双链RNA(dsRNA)在细胞内特异性的将与之同源的 mRNA降解成21nt~23nt 的小片段,使相应的基因沉默。 ③ RNAi是将与靶基因的mRNA 同源互补的双链RNA(dsRNA ) 导入细胞,能特异性地降解该mRNA ,从而产生相应的功能表型缺失, 属于转录后水平的基因沉默(post - transcriptional gene silence , PTGS)。 牵牛花中dsRNA介导查耳酮基因沉默模式 RNAi应答的基本特征 1 靶基因内源性序列不发生改变。 2 细胞质中靶mRNA水平下降,但细胞核的mRNA前体数量未受影响。 3 每个细胞仅需要少量分子就可对大量mRNA发挥作用,提示存在某些放大 和/或 催化活性在起作用。 4 RNAi效应可以在线虫体内传播。 RNAi机制示意图

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