医药基础-放射性示踪技术-63页.pptxVIP

放射性核素示踪技术Radioactive Nuclide Tracer Method思考题1如何评价某新型扩冠脉新药对心肌营养性血流量的影响？思考题2从某中药中提取得某单体可能对瘤细胞DNA合成有抑制作用，如何设计一体外实验进行验证？思考题3 如何比较口服止血药A及剂型改进型B对消化道出血的治疗效果？一、概念放射性核素示踪技术是利用放射性核素及其标记化合物作示踪剂来研究生物体内各种代谢物质的吸收、分布、排泄、转移规律及疾病诊断的一门科学。 Label:放射性核素Substance：观察对象System:整体、离体Labeled-Substance吸收、分布、排泄… 放 射 性 核 素 示 踪 技 术**放射性核素稀释法**物质吸收、分布、转化、 排泄的示踪研究*放射性核素示踪动力学细胞动力学的示踪研究药物代谢反应机制的示踪研究 分子生物学的示踪研究特定探针（单克隆抗体、配基等）的 示踪研究 ……. 二、原理● 放射性核素及标记化合物与 相应普通原子及分子具相同 的生物学性质.如I与125I、雌 二醇与3H-雌二醇● 放射性核素发出的射线可记 录分析三、放射性核素示踪的特点 ● 灵敏度高 ● 检测方法简单 ● 合乎生理条件 ● 定位准确 ● 非创伤性10-15~10-18待分析物析量g放射性核素示踪技术10-1010-810-8层析分光光度色质谱10-2比色四、常用示踪方法及其应用 放射性核素稀释法 物质吸收示踪法 物质转化示踪法 物质分布示踪法 物质示踪动力学● 血浆中示踪物的含量测定时相曲线时相曲线下面积（area under curve AUC)生物利用度(bioavailability) 绝对生物利用度(absolute bioavailability 相对生物利用度(relative bioavailability)● 整体计数法测定吸收率● 尿排出量测定 2. 物质吸收化学形态的示踪研究 3. 物质吸收部位的示踪研究（三）物质转化示踪研究参入实验:研究生物体系中化合物A与B是否为产物和前身物的关系或转化的必要条件 ● 参入实验的类型 整体参入实验 离体参入实验● 参入实验应用 1.淋巴细胞转化实验细胞免疫功能肿瘤细胞增殖铅中毒病人淋巴细胞转化率 淋巴细胞转化率（104CPM/ 106淋巴细胞） 病人 n=60 21.27±10.32 正常 n=100 48.96±21.462.代谢物转化实验 细菌放射呼吸实验：原理 ： 细菌→CO2 14C-葡萄糖、14C-氨基酸 →14CO2 设备：细胞代谢快速闪烁计数器 滤膜 培养液细菌放射呼吸实验的应用： 生长指数（GI）测定：GI=Ci/C0 GI＞3 为阳性 细菌倍增时间（t2x）测定： logR2-logR1=K(t1-t2) t2x=0.301/K R2 为t2的计数，R1 为t1的计数，K为对数生长期的速度常数。常见需氧菌倍增时间（min）3.参入竞争抑制实验：体外抗肿瘤药物筛选 卵巢癌常用化疗药物体外敏感实验 Drug IR（%） ADM 57.73 Carbo 29.38 BLM 38.26 VCR 56.80 Taxol 63.35 Holoxan 32.97 MMC 19.34 DTIC 38.31 ADM+Carbo 70.90 VCR+Carbo+BLM 75.27（四）物质分布的示踪研究物质在组织、脏器浓集并保留一定时间是该物质对器官或组织发挥作用的前提18F-DG---脑、心肌…14C-氟烷---大脑、小脑白质35S-乙酰唑胺---海马 3H-青蒿素--疟原虫质膜与 食物泡…主要参数： dpm/g组织