基于口蹄疫病毒非结构蛋白3AB的ELISA鉴别检测方法的分析-兽医专业论文.docxVIP

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2019-03-30 发布于上海
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基于口蹄疫病毒非结构蛋白3AB的ELISA鉴别检测方法的分析-兽医专业论文.docx

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7 7 with horseradish peroxide enzyme was used as the second antibody, the anti-non-structural protein antibody detecting method was established. Specific of NSP-3AB ELISA was 96.68% in 1,746 immunity swine serum; it was 97.96% in 1,077 health swine serum; its positive rate was 100% for 36 swine serum infected FMDV by man. However, the specific of bovine serum was respectively 94.04%, 97.96%, 100%. Further improve the 3AB-ELISA detection method, using skim milk and E. coli lysate as the method of blocking agent, effectively reducing the background value and eliminate non-specific response. TMB used for the color of the testing environment than the requirements of the OPD wider to enable the detection of practicality better.The result of Comparison between 3AB-ELISA and similar foreign kit, the detection rate of positive bovine serum, 3AB-ELISA the positive rate was 91.7%, UBI kit was 79.2%, higher than the UBI kit 12.5 percentage points. On the negative bovine serum testing, they are almost unanimous. KEY WORDS: Foot-and-mouth disease virus ,Non-structural protein, expression,purification,ELISA 目录一、口蹄疫病毒研究进展………………………………………………………………12 1. 概况 …………………………………………………………………….……………12 2. 口蹄疫病毒分子生物学特 …………………………………………………..……..13 2.1 口蹄疫病毒基因表达 …………………………………………………………….14 2.2 FMDV 非结构蛋白及功能 ………………………………………………….…….14 3. 口蹄疫病毒的复制与感染 ………………………………………………………...15 3.1 FMDV 感染细胞的机制 …………………………… …………………………….15 3.2 FMDV 的翻译 ………………………………………………………………………15 3.3 FMDV RNA 的合成 ………………………………………………………………...16 3.4 病毒颗粒的包装 …………………………………………………………………...16 3.5 病毒的病原性 ……………………………………………………………………...16 4. 主要的诊断方法 …………………………………………………………………….17 4.1 免疫血清学诊断 …………………………………………………………………...17 4.2 分子生物学技术诊断 ……………………………………………………………..18 二、重组口蹄疫病毒非结构蛋白 3AB 基因的克隆与表达 ………..…………………21 1. 实验材料 …………………………………………………………………………21 1.1 实验仪器 ………………………………………………………………………..…21 1.2 实验试剂 ………………………………………………………………………..…21 1.3 菌种、质粒及口蹄疫非结构蛋白 3ABC 基因片断 ……………………………….21 2. 试剂配制 …………………………………………………………………………….21 2.1 LB 培养基( 1L ) ……………………