课件：连翘提取物提取分离工艺及其检测方法进展.ppt

连翘简介 连翘苷类的提取分离工艺 连翘苷类的检测方法 结语 参考文献 连翘 连翘(Fructus Forsythiae)为木犀科植物连翘Forsythia suspensa (Thunb.)Vahl的干燥果实,主产于我国山西、陕西、河南、山东等地。具有清热解毒、消肿散结之功效,主治温热、丹毒、斑疹、疮疡肿毒、瘰疬等症。我国药典规定，连翘的原植物为木犀科连翘 (Forsythia suspense Thund. Vahl) 的成熟果实。秋季果实初熟尚带绿色时采收，除去杂质，蒸熟，晒干，习称 青翘 ；果实熟透时采收,晒干，除去杂质，习称“老翘”在国际市场上，其同属植物金种花(F.viridissima)和朝鲜连翘(F.koreana)亦作为连翘正品使用[1]。 连翘中的化学成分主要包括萜类、苯乙醇苷类、木脂素类、黄酮类、天然醇类、香豆素、挥发性成分和一些醇、酯、酸、醛、酮等化合物。连翘苷类是连翘所含的主要有效化学成分，主要包括连翘苷和连翘酯苷两种成分，其中连翘苷的含量较大且抗菌抗病毒活性很强[2]。 1.连翘苷类的提取分离工艺 1.1 连翘苷的提取分离工艺 王丽娅等采用正交设计法研究以乙醇作溶剂利用回流法提取苷类的提取工艺，以乙醇浓度85%、回流次数3，回流时间60min和料液比1：10等提取条件下，连翘苷平均得率为5.781%[3]。胡光等采用正交实验法优选乙醇提取连翘苷的工艺，认为提取连翘苷的最佳工艺条件为80%乙醇，料液比为1:8，回流时间2h,共提取2次[4]。 于春波等采用70%乙醇回流，D2820型人孔吸附树脂纯化的方法制备得到连翘苷的含量达到27.2%的产品[5]。卢静华等采用正交实验法优选连翘中连翘苷的最佳提取工艺，认为连翘中连翘苷的最佳提取工艺为加10 倍水，超声提取3 次，每次30 min，提取连翘中连翘苷平均含量达到0. 28%，RSD = 1. 15%[6]。武果桃等对比了超声提取和索氏提取两种提取方法，结果显示以超声法从连翘中提取连翘苷的提取率较高[7]。 1.2连翘酯苷提取分离工艺 王霖娇等提出了一种连翘酯苷提取新工艺，原料经乙醇冷浸、大孔树脂粗分离后过葡聚糖凝胶柱和C18中压柱精分离获得纯度达98%的连翘酯苷产品[8]。高学敏等采用回流提取，大孔树脂法分离制备连翘酯苷，并通过正交试验法考察加醇量、回流时间、回流次数、醇浓度4个因素，研究不同类型大孔树脂对连翘酯苷收率的影响，得到连翘酯苷纯度为18.3%-22.5%的产品[9]。 王进东等认为D101型大孔树脂分离纯化连翘酯苷能显著提高连翘酯苷的纯度，其最佳工艺为上样液浓度含连翘生药1.2g/ml, 苷的最佳工艺为上样液浓度为含连翘生药 1.2 g/mL, 用 6 BV的 30%乙醇液进行洗脱, 二次洗脱后, 连翘酯苷的含量可达 60%以上。并得出结论，该技术能显著提高连翘酯苷的纯度, 具有吸附量大, 洗脱容易, 经济环保等优点, 适合于规模化生产[10]。 刘明等以连翘酯苷 A 含量为指标，采用高效液相法， 考察 D- 101 型， D- 201 型，HPD- 100 型， HPD- 300 型等8 种大孔吸附树脂对连翘中连翘酯苷 A 吸附纯化工艺条件，结果表明HPD- 300 型大孔吸附树脂具有最佳的吸附洗脱参数， 其动态饱和吸附－洗脱量达3.57% 其吸附分离连翘酯苷 A 的工艺条件为:上样浓度为0.3g( 生药) /ml,吸附流速为1BV/h ,以 5 倍柱体积水洗脱,继以7 倍柱体积50%乙醇洗脱。 结论是该技术适用于连翘中连翘酯苷 A 粗提取的工业化生产， 连翘酯苷 A 纯度可达50%左右[11]。 王鹏等通过药效学实验比较连翘超临界 CO2 萃取物、 分子蒸馏蒸出物和水提物的解热、 镇痛效果。其方法为用 2 , 4 -二硝基苯酚法比较萃取物、 分离物及水提物的解热效果; 腹腔注射醋酸溶液法比较萃取物、分离物及水提物的镇痛效果。结果显示连翘水提物的解热、 镇痛效果均优于超临界萃取物和分子蒸馏蒸出物。因此得出结论连翘发挥解热和镇痛作用的主要有效成分存在于水溶性部分[12]。 2.1连翘苷类的检测方法 2.1连翘苷的检测方法 雷建林等采用反相高效液相色谱法测定不同产地连翘药材中连翘苷的含量，流动相为乙腈－水( 25:75) ， 流速为1.0mL min -1， 检测波长为277nm，进样量为10 L，柱温为30℃ 结果:在选定色谱条件下， 连翘苷分离度良好， 线性范围为0.4348～ 4.348 g， r = 0.9999， 平均回收率98.9%， RSD = 0.68%( n = 6)[13]。 王玮等分别以拉曼峰的相对峰强和峰面积比值作为参量， 以不同采收时期和不同产地的连翘叶为对象， 采用内标法进行连翘苷的含量测