临床医学研究生课件-现代医学实验仪器与实验技术-细胞分选.pptxVIP

细胞分选技术;细胞分选和基本原理;细胞分选常用方法;细胞的分级分离;1、差速离心法：用于分离大小、形状不同的组分，根据颗粒沉降速度不同得以分离;;2、速度区带离心法：用于分离大小差别不显著的组分;3、等密度离心法： 按细胞组分的浮力密度不同进行分离的方法。 适用于大小、形态相似而密度不同的组分。 常将样品通过高浓度的蔗糖或氯化铯的密度梯 度沉降在达到与自身密度相等的位置就停滞不再向下沉降。;蔗糖密度梯度离心法分离内质网微粒体;外周血中提取人淋巴细胞（PBMC） 分层液：多聚蔗糖（Ficoll）-泛影葡胺（Urografin分层液，比重是 1.077±0.001。 Ficoll是蔗糖的多聚体，呈中性。平均分子量为400000，密度为1.2g／ml，未超出正常生理性渗透压，也不穿过生物膜。红细胞、粒细胞比重大，离心后沉于管底；淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重，离心后漂浮于分层液的液面上，也可有少部分细胞悬浮在分层液中。吸取分层液液面的细胞，就可从外周血中分离到单个核细胞。 ;密度梯度离心(Ficoll离心);密度梯度离心(Ficoll离心);;免疫磁珠分选细胞（MACS）(Magnetic Activated Cell Sorting);二、免疫磁珠法分离方法;正选和负选的比较;去除分