修改癌基因与肿瘤经典教程.pptVIP

染色体重排对癌基因的影响 21三体易继发急性白血病，是正常细胞的8~20倍 XXY易继发乳腺癌 基因重排促进了原癌基因的表达，试验证明了这个结论。 将c-myc与Ig基因启动子拼接后制备的转基因鼠，体内c-myc得到了高效表达。 强启动子的插入 原癌基因产物巨增的原因： 抑癌基因突变，抑癌基因产物失活，不能阻遏原癌基因的表达，导致原癌基因产物过量，促使细胞癌变。 原癌基因中插入强启动子，使其表达过量，导致细胞癌变。 例如RVS转化细胞，其中pp60svc蛋白含量比正常细胞高10 ～100倍，该蛋白与正常c-src基因产物在质量上并无区别，只是转化细胞中数量增加，使细胞代谢失衡，导致癌变。 原癌基因的扩增 白血病细胞中的c-myc基因可扩增8-22倍。 原癌基因的扩增具有细胞遗传学的一些特点，即表现为均质染色区（HSR）和双微染色体（DM）。 均质染色区指的是染色质在染色中没有常染色质和异染色质的区别。 原癌基因的扩增提供了更多的模板而引起的转录和翻译产物的增加。 原癌基因的扩增促进了癌基因产物的高效表达。 原癌基因的扩增可能出现在肿瘤发生和发展的任何阶段。 近年研究发现癌基因的扩增与愈合相关。 有扩增者治疗后复发的机率比无扩增者的高8倍。 原癌基因的扩增可能是肿瘤发生过程中的继发变异。 抑癌基因的致癌机理 点突变 缺失 剪接信号的改变 磷酸化 Rb基因 视网膜母细胞瘤是Rb基因的点突变和缺失或其他原因造成的功能缺陷是致病的主要原因。 骨癌、乳腺癌、膀胱癌等其他一些肿瘤中都存在Rb基因缺失或功能缺陷的现象。 Rb基因的抑癌基因， Rb基因长约200kb，由27个外显子组成，其中13～17个外显子是基因重组的热点。 Rb基因失活表现为缺失、编码区的点突变、微小缺失以及RNA剪接信号序列的改变等。 Rb基因的点突变或缺失导致表达的产物的功能缺陷，从而失去了对癌基因的控制作用。 Rb基因产物P110 是DNA结合的磷酸化蛋白质， 参与基因活性的调控 Rb的分子功能： (1)主要是可以和肿瘤抗原相互作用： SV40 T抗原，腺病毒E1A抗原，人类乳头瘤病毒E7抗原，可结合到RB的379~792残基区域。 (2) RB产物可抑制部分致癌蛋白。 (3)RB还有抑制细胞增殖的作用。 Rb基因产物的调控 Rb基因的转录产物是4.7kb的mRNA 编码一个含有928个氨基酸组成的蛋白质P110， P110蛋白相对分子量为110000，是一种能与DNA结合的磷酸化蛋白质，其功能是参与基因活性的调控。 整个细胞周期的不同阶段Rb蛋白的磷酸化水平不同， 非磷酸化的P110W能使细胞停留在G0期，并有促进分化的作用，抑制细胞的增殖， 磷酸化的P110能使细胞进入DNA合成期而开始有丝分裂，Rb蛋白是细胞增殖的负调控因子。 在细胞周期中Rb磷酸化受到调控 G0/G1 去磷酸化，G1末至G2末被细胞周期蛋白CDK复合物磷酸化。 非磷酸化的Rb可结合转录因子E2F及许多肿瘤抗原。 肿瘤抗原(SV40T,Ad E1A)和Rb结合 RB 位于13q14，编码视网膜母细胞瘤蛋白 Rb，能结合肿瘤抗原,（SV40 T抗原）调控细胞周期， 抑制细胞增殖，最早在视网膜母细胞瘤的研究中被发现。 P110的作用 转化试验表明，P110还能与腺病毒癌基因的产物E1A、SV40的大T抗原、人乳头瘤病毒的E7转化蛋白等形成复合物，Rb蛋白（P110）被抵消作用的同时，Rb基因被激活，从而增加了转录和翻译，反过来抵消了癌基因的作用。 Rb蛋白能与癌基因结合，抑制了癌基因的表达，在结合过程中，由于P110的用量增加，Rb基因的表达量也随着提高，从而有效的抑制了癌基因的表达。 P53基因的作用 P53是一种较为常见的肿瘤抑制蛋白。 P53基因的突变或缺失是主要致癌原因。 P53基因表达的产物蛋白是一种转录因子，并以四聚体形式与特异的DNA序列结合，对靶基因的表达进行调控。 P53的致癌机理与Rb相似，即以隐性纯合子或半合子状态导致细胞癌变。 P53基因具有抑制肿瘤细胞生长的活性，在人类中P53的基因定位于17p13.1，由11个外显子组成，第1个外显子不编码，外显子2、4、5、7、8分别编码5个进化上高度保守的结构域。 P53基因的表达产物以四聚体形式与DNA特异性结合，并能直接激活转录，也能通过抑制原癌基因的产物或表达水平对原癌基因实行负调控。 p53的功能: （1）一种可能是野生型p53与细胞中某些T抗原的类似物结合，抑制了它们的活性; （2）p53也是一种DNA结合蛋白，它能识别长10bp两侧对称的模体，并激活含多拷贝这种基序的启动子的