尼莫同对MCAO大鼠AQP4mRNA表达、脑细胞内Ca_2722b_浓度与脑水含量的影响.pdfVIP

5、TTC染色：验证模型制备成功。 二、检测指标 l、脑组织含水量的测定：按干湿重法测定脑水含量。 2、脑细胞内钙离子浓度测定：以Fura-2／AM为荧光指示剂，应用双波长荧 光分光光度计测定脑细胞内钙离子浓度。 3、脑组织AQP4mRNA的测定：通过半定量逆转录聚合酶链反应(RT—PCR) 检测AQP4mRNA的表达。 三、统计学处理 所得结果采用SPSSl3．0统计软件进行处理。各组实验数据采用i±s表示， 各组数据平均数之间的差异采用单因素方差分析，以PO．05为有显著性差异。 结 果 大脑中动脉闭塞后，脑水含量、AQP4mRNA表达及脑细胞内钙离子浓度均在 6h开始升高。3d时达到高峰，之后缓慢下降，7d时仍高于正常水平。实验结果 显示脑水含量、AQP4mRNA表达和细胞内钙离子浓度之间，其中每二者之间呈正 性相关(P0．01)。钙离子拮抗剂尼莫同能够降低AQP4mRNA表达，降低脑细胞内 钙离子浓度。 讨 论 孔道特异蛋白质家族，参与调节水的跨膜运输和水的平衡，主要表达于星形胶质 细胞和室管膜细胞内，是胶质细胞与脑脊液以及血管问的水调节和转运的重要结 构基础。本实验中可以得出，假手术组大鼠脑组织也有AQP4mRNA表达，手术组 有显著性差异(P0．05)。从脑水含量与AQP4mRNA表达的相关分析可以看出，二 切相关，AQP4mRbIA的表达与脑水肿的程度里正比关系。 Ca2十作为细胞内第二信使，参与神经递质的合成与释放，神经兴奋性的维持 及多种酶的活动。在本实验中可以得出，手术组大鼠脑细胞内Ca2+浓度较假手术 2 组明显增高，有显著性差异(PO．05)。脑缺血6h后Ca”浓度已明显比假手术组 增高，3d达到高峰。从脑水含量与ca”浓度的相关分析可以看出，二者具有正性 相关(r=O．814，PO．01)。表明缺血性脑水肿与Ca”超载有着密切的关系。本实 验中，钙离子浓度与AQP4mRNA表达的变化规律也一致，二者具有正性相关 (r=0．817，PO．01)。提示二者可能共同参与缺血性脑水肿的形成。 尼莫同是二氢吡啶类(DHPs)钙离子拮抗剂，它可以透过血脑屏障，与脑组织 的亲和力强，对神经细胞有一定的保护作用。在本实验中，尼莫同组的脑水含量、 脑细胞内Ca2+浓度及AQP4mRNA表达均比手术组低，说明尼莫同作为钙离子拮抗 剂可以减少Ca”的内流，下调水肿组织的AQP4mRNA表达，从而减轻脑水肿，起 到保护脑细胞的作用。 结 论 1、本实验结果提示大鼠大脑中动脉闭塞后脑水含量、AQP4mRNA表达和细胞 内Ca”浓度均增高。AQP4mRNA的高表达及ca”浓度的增加，可引起脑水肿。 2、实验结果显示脑水含量、AQP4mRNA表达和细胞内ca2+浓度之间，其中二 者之间呈正性相关。 3、钙离子拮抗剂尼莫同能够降低AQP4mRNA表达及脑细胞内Ca2+浓度，从而 减轻脑水肿的程度。 关键词 脑缺血；水通道蛋白一4；脑水肿；钙离子浓度：钙离子拮抗剂 3 ·英文论著摘要· Theeffectof on of AQP4mRNA， Nimotopexpression concentrationofCa2+inbraincellandbrainwater contentofMCA0rats objective Ischemicbrainedemaisoneofthe ofcerebral important stroke，as complications wel