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临床输血前免疫血液学检查
一、输血前检查的目的和要求
输血前检查的目的是选择与患者血型配合的各种血液成分,使之能在患者体内有效地存活,无不良反应,从而达到安全、有效输血的目的。
二、输血前检查的内容
输血前检查的内容包括如下几个方面:
1.患者的病史和标本等的检查、核对及处理。
2.受血者、献血者ABO和Rh血型鉴定。
3.不规则抗体的筛选和鉴定。
4.交叉配合试验。
5.血小板输注前的抗体检查和配合试验。
6.交叉配血结果的报告和发血。
(一)受血者的病史和标本等检查、核对及处理
病史资料和信息
受血者的有关资料,包括受血:者姓名、年龄、性别、床号、种族、临床诊断、输血史、药物史、妊娠史,特别是以往输血反应的记录等等,有助于解决有可能出现的血清学问题。
2.标本的要求
要求不超过3天的期限,反复输血的受血者更应注意抽取新的标本作配血试验,避免因回忆反应而产生的抗体漏检。如果患者使用肝素治疗,则应用鱼精蛋白,使标本凝结。如果患者使用右旋糖酐等治疗,应注意将红细胞作洗涤。
(二)受血者和供血者ABO和Rh定型
1.ABO定型 最适的反应温度为4℃,但在室温反应良好,所以常规的ABO定型试验仅在室温进行。
(1)定型方法:正、反定型的试管离心方法目前仍被认为是最可信赖的ABO定型方法。
1)定型试剂:有些ABO血型诊断试剂是以人的血清汇聚而制成的,但必须具备以下条件:第一,高效价(1:128)的IgM抗A或抗B。第二,具较好的亲和性并不含冷凝集素。第三,必需具有检测A2,A2B血型的能力。第四,血清必须通过HIV,HCV,HBV等检查或经病毒灭活。另外一些ABO定型试剂是由来自培养细胞株的单克隆抗体所制成。
2)ABO亚型的鉴定:ABO亚型的鉴定通常使用下列试剂:抗A、抗B、抗A1、抗H、抗AIA1红细胞、A2红细胞、B型红细胞和O型红细胞。有些工作者在定型试验中,常规地选择应用抗AB抗血清,以避免错误地把弱反应性A或B型红细胞分类为O型。一般抗AB试剂对Ax型红细胞可增加凝集反应的强度。
(2)ABO定型试验中的常见问题:造成这种正反定型不一致的原因主要有:
1)技术和管理错误:这是ABO定型中产生异常结果的主要原因,包括:标本或试剂搞错;器材不洁;试剂污染或失效;离心过度或不足;阳性反应产生溶血现象未能识别;漏加试剂;结果记录或判断错误;细胞与血清间比例不适当。
2)血清异常:血清蛋白引起缗钱状形成,影响反定型结果。
3)红细胞致敏:受免疫球蛋白致敏的红细胞,在含高蛋白介质的试剂中,可发生凝集。
4)异常基因型:ABO亚型的检查中,A、B抗原可能为弱抗原,难以检出。
5)近期输血:试验前曾输入过其它ABO血型不一致的血液,使血液标本成为混合血型的红细胞悬液,定型时显示“混合外观凝集”现象。
6)嵌合体血型:这种血型者体内有两类血型红细胞群体,定型时可以出现“混合外观凝集”现象。
7)疾病因素导致抗原减弱:某些白血病患者和难治性贫血患者中,ABO血型系统的抗原性可受到抑制,检出困难。
8)红细胞多凝集现象:红细胞因遗传或获得性的表面异常,发生多凝集现象。
9)获得性B:由于革兰阴性杆菌的作用,红细胞可获得“类B”的活性。
10)血型特异性物质过高:一些卵巢囊肿病例,血型物质的浓度很高,可中和抗A和抗B定型试剂,要得到正确的正定型结果,必须洗涤红细胞多次。
11)近期内进行大量的血浆置换治疗:由于使用大量的非同型的血浆作置换治疗,标本血清中含有所输供体提供的抗A或抗B抗体,造成反定型错误。
12)异常的血浆蛋白:受检者血浆中异常的白蛋白、球蛋白比例和高浓度的纤维蛋白原等导致缗钱状形成,造成假凝集现象。
13)不规则抗体的存在:受检者血浆中,含有ABO血型抗体以外的不规则抗体,与试剂红细胞上其他血型抗原系统的抗原起反应。
14)低丙种球蛋白血症:低丙种球蛋白血症(丙种球蛋白量减低)病例,可能会因免疫球蛋白水平下降而使血清定型时不凝集或弱凝集反应。
15)药物等因素:药物、右旋糖醉及静脉注射某些造影剂可引起红细胞凝集或类似凝集。
16)年龄因素:免疫系统尚未健全的婴儿、由母亲被动获得抗体的婴儿,或抗体水平下降的老人,试验时可出现异常的结果。
17)防腐剂因素:患者体内可能含有对防腐剂中的成分或对混悬介质的抗体,导致ABO定型差错。
Rh(D)定型和定型试验中应注意的问题
Rh定型主要鉴定D抗原(IgG抗D和IgM抗D)。
(1)导致Rh血型鉴定可能出现假阳性的原因:
1)受检细胞已被免疫球蛋白致敏,或标本血清中含有引起红细胞凝集的因子。
2)受检细胞与抗血清孵育的时间过长,含高蛋白的定型试剂会引起缗钱状形成。
3)标本抗凝不当,受检过程中出现凝血或小的纤维蛋白凝块,误判为阳性。
4)定型血清中含有事先未被检测的
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