新型精胺氧化酶小分子抑制剂SI-4650抗人骨肉瘤活性及-药学学报.PDFVIP

·454 · 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2019, 54(3): 454 −462 新型精胺氧化酶小分子抑制剂SI-4650 抗人骨肉瘤活性 及分子机制研究 周 游, 王艳林, 孙丽丹, 曹春雨, 杨建林* (三峡大学医学院, 肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室, 湖北宜昌443002) 摘要: SI-4650 是本实验室新近发现的一种新型精胺氧化酶(spermine oxidase, SMO) 小分子抑制剂, 本研究的 目的是进一步探究SI-4650 对人骨肉瘤143B 细胞增殖、迁移能力的影响及其分子机制。研究利用化学发光法和高 效液相色谱法分析SI-4650 对143B 细胞中SMO 活性的影响; DIOC6(3) 探针染色/流式细胞术分析细胞中活性氧的 堆积水平; MTT 法和流式细胞术检测SI-4650 对细胞增殖和周期的影响; Transwell 法和Western blot 分析细胞迁移 相关蛋白的表达; PI/FITC-Annexin V 双染、倒置荧光显微镜观察和Western blot 法分析细胞凋亡和自噬。结果显示, SI-4650 可显著性抑制人骨肉瘤143B 细胞内SMO 酶活性, 高效抑制143B 细胞的增殖和迁移能力, 并引起S 期周期 阻滞, 其机制可能与干扰多胺代谢、活化线粒体介导的细胞凋亡途径和引起自噬性死亡相关。上述研究结果提示, SI-4650 具有用于人骨肉瘤临床治疗的潜在价值。 关键词: 多胺代谢; 精胺氧化酶抑制剂; 人骨肉瘤细胞; 细胞增殖; 迁移; 凋亡; 自噬 中图分类号: R966 文献标识码: A 文章编号: 0513-4870(2019)03-0454-09 Anti-osteosarcoma activity and underlying molecular mechanism of a novel small molecule spermine oxidase inhibitor SI-4650 ZHOU You, WANG Yan-lin, SUN Li-dan, CAO Chun-yu, YANG Jian-lin* (Medical College of China Three Gorges University, Hubei Key Laboratory of Tumor Microenvironment and Immunotherapy, Yichang 443002, China) Abstract: The purpose of this study is to further explore the effects of SI-4650, a newly discovered small molecule inhibitor of spermine oxidase (SMO) in our laboratory, on proliferation and migration of human osteo‐ sarcoma 143B cells and its underlying molecular mechanism. Chemiluminescence and high performance liquid chromatograph were used to analyze the effect of SI-4650 on SMO activity in 143B cells. DCFH-DA-staining / FCM was used to analyze the accumulation of cellular reactive oxy