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独 创 性 声 明
本人声明,所呈交的学位论文,在指导教师指导下,通过我的努力取得的成果, 并且是自己撰写的。尽我所知,除了文中作了标注和致谢中已经作了答谢的地方外, 论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果,也不包含在浙江农林大学或其他教 育机构获得学位或证书而使用过的材料。与我一同对本研究做出贡献的同志,都在 论文中作了明确的说明并表示了谢意。如被查有严重侵犯他人知识产权的行为,由 本人承担应有的责任。
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本人完全了解浙江农林大学有关保留、使用学位论文的规定,即学校有权送交 论文的复印件,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的全部或部分内容,可 以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。
保密,在 年后解密可适用本授权书。□ 不保密, 本学位论文属于不保密。 □
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II
摘要
摘要
国兰是中国传统名花,其香味被称为国香,几乎包含了所有花卉的香型,花型、 花色和叶型都有洋兰及其它花卉不可超越的特色和优点,具有得天独厚的优势,深 受国人喜爱。为了研究国兰种间及种内不同种质的遗传多样性,为国兰有性杂交、 种质早期选择及育种研究提供一定的理论依据,本文利用形态学标记和分子标记两 种方法对国兰表型多样性和 SCoT 标记多样性进行了研究和探讨。对 163 盆国兰的 42 项表型性状进行了观测和分析;对 83 盆国兰进行了 SCoT 分子标记研究,主要 结论如下:
(1)国兰的遗传多样性极为丰富,形态学标记和分子标记都表现出较高的遗传 多样性,总体的遗传多样性主要分布于种间。国兰数量性状离散程度较大,变异系 数较大,多样性丰富;多数质量性状多样性丰富程度较高;国兰的各种质的遗传相 似系数均在 0.3836-0.9178 之间,遗传多样性指数在为 0.3764,香农指数为 0.5551, 遗传多样性丰富程度较高。
(2)6 个国兰种的遗传多样性丰富程度的差异不大,表型性状和 SCoT 分子标 记结果都显示国兰种间的遗传多样性丰富程度的差异不大。国兰各种的数量性状的 平均变异系数在 14.24%-20.31%之间;遗传多样性指数在 0.2185-0.2897 之间,香农 指数在 0.3239-0.4243 之间。
(3)国兰基于表型性状的聚类结果与 SCoT 聚类结果有一定差异。基于表型性 状,墨兰、蕙兰和寒兰被聚为一类,春兰、春剑和莲瓣兰被聚为一类;基于 SCoT 标记,春剑和春兰被聚为一类,蕙兰、莲瓣兰及寒兰被聚为一类,墨兰被单独聚为 一类。基于表型性状的聚类结果显示春兰、春剑及莲瓣兰亲缘关系较近。SCoT 聚 类结果显示春剑和春兰亲缘关系最近;莲瓣兰与寒兰亲缘关系最近,与春兰和春剑 表现出较远的亲缘关系。
(4)适用于国兰 SCoT-PCR 的最优反应体系为:2μL 10×Buffer、1.6μL Mg2+
(25mmol/L)、2.5μL DNA(20ng/μL)、1μL 引物(10μmol/L)、0.4μL dNTP Mixtures
(10mmol/L)、12.5μL ddH2O,总体积为 20μL;最佳退火温度为 51℃。
(5)国兰 SCoT-PCR 分子标记的特异性较强,可以为国兰遗传多样性的分析提 供技术基础。成功实现了对 83 份国兰种质的遗传遗传多样性分析,共得到 3486 个
遗传相似系数,所有国兰的遗传相似系数均在 0.3836-0.9178 之间,实现了对试验材 料的遗传相似性定量分析。
关键词:国兰;表型性状;SCoT 标记;分子标记;遗传多样性
I
AB
ABSTRSCT
ABSRACT
Chinese orchid is traditional famous flower in China with national fragrance for it almost includes all kinds fragrance. Its features and advantages of flower type, flower color and leaf type can not be matched by cattleya and any other flowers. With the unique strength, it is deeply loved by Chinese. To study genetic diversity between various germplasms of interspecific and intraspecific Chinese orchid and to provide some theoret
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