免疫凝集反应及临床应用.pptxVIP

免疫凝集反应及临床应用;　细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等颗粒性抗原，或可溶性抗原（或抗体）与载体颗粒结合成致敏颗粒后，它们与相应抗体（或抗原）发生特异性反应，在一定条件下，形成肉眼可见的凝集现象。 ;反应阶段： 抗原抗体的特异性结合阶段 出现肉眼可见的凝集现象;可见反应形成;电解质：稀释液或缓冲液（8.5g/L NaCl） pH：pH6～pH9（ pH3为细菌抗原的等电点） 温度：15℃～40℃，37℃最适（ 4℃特例 ） 反应时间：不同反应时间不同 外力：震荡或搅拌;分类：直接与间接凝集反应; 颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。 包括： 玻片凝集试验 试管凝集试验 ;;;;+;; 将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面，然后与相应的抗体或抗原反应，在电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象;RBC、白陶土、活性炭、某些细菌、聚苯乙烯胶乳颗粒 良好载体有如下几点基本要求：①在生理盐水或缓冲液无自凝倾向；②大小均匀；③比重与介质相似，短时间内不能沉淀；④无化学或血清学活性；⑤吸附抗原（或抗体）后，不影响其活性。 目前应用最广的是人的O型红细胞和绵羊红细胞。而后者应用更广，因为其来源方便。另外绵羊红细胞的表面有大量的（约1 000个以上）糖蛋白受体，极易吸附某些抗原物质，吸附性能好。 ;正向间接凝集试验 反向间接凝集试验 间接凝集抑制试验 协同凝集试验;用抗原致敏载体--检测抗体;;;反向间接凝集试验，载体为金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌的细胞壁成分A蛋白，和IgG的Fc段结合，使Fab段暴露在菌体表面， Fab段仍然保持正常的抗体活性。 利用这种特性可以将特异性IgG结合在菌体上，形成致敏颗粒，检测特异性抗原。; 原理图;间接血凝试验 胶乳凝集试验 明胶凝集试验;以红细胞为载体的间接凝集试验。 将已知抗原(或抗体）致敏红细胞，与相应抗体（或抗原）特异结合，出现红细胞凝集现象。;;-：红细胞沉积于孔底 +：红细胞沉积于孔底，周围有散在少量凝集 ++：红细胞形成凝集，面积较小，边缘较松散 +++：红细胞形成片层凝集，面积略多于++ ++++：红细胞形成片层凝集，均匀布满孔底，或边缘皱缩如花边状;与一般间接血凝试验不同之处为反应中的红细胞是未经致敏的受检者新鲜红细胞 主要试剂材料为抗红细胞单克隆抗体，能与红细胞结合，但不引起凝集反应 这种抗体与另一特异性抗体连接成的双功能抗体可用于检测标本中的抗原 如与特异性抗原连接，则可用于检测标本中的抗体 反应中的标本为受检者的全血 HIV抗体、HBV抗原检测;胶乳凝集试验;明胶凝集试验;抗球蛋白参与的血凝试验;抗球蛋白参与的血凝试验;抗球蛋白参与的血凝试验;直接Coombs试验;新生儿溶血症 自身免疫性溶血症 特发性自身免疫性贫血 医源性溶血;间接Coombs试验;检测母体Rh(D)抗体 检测红细胞不相容的输血所产生的血型抗体