光期高温与暗期高温对水稻米质和籽粒蛋白表达影响的差异研究-生理学专业论文.docxVIP

光期高温与暗期高温对水稻米质和籽粒蛋白表达影响的差异研究摘 光期高温与暗期高温对水稻米质和籽粒蛋白表达影响的差异研究 摘 要 全球气候变暖已经成为不可逆转的变化趋势，给生态环境和粮食安全生产带来 了重大影响，并且这种气温升高的潜在影响将进一步加剧。目前气候变暖对农作物 生产的影响倍受各国科学家和政府的重视。温室气体所导致的气候变化使平均气温 升高，且夜间温度上升幅度更为明显。水稻生长期特别是开花及灌浆期的高温热害 导致结实率大幅降低甚至绝收，同时影响稻米品质。近数十年来，国内外关于高温 对水稻产量和米质影响的研究较多，水稻高温遗传与生理基础研究已成为热点方向。 研究籽粒形成过程中光期和暗期的高温影响差异，将对充分认识和评估气温升高对 水稻产量和品质的影响有一定参考意义。 本研究选取高温适应性不同的4个中籼稻品种93ll、蜀恢527、N22和特籼占， 利用人工气候箱在灌浆期进行不同的温度处理：光期高温(35℃／27℃)、暗期高温 (27℃／35℃)和对照(28℃／20℃)，时间为受精后持续20 d，对灌浆期不同温度 处理对稻米品质和籽粒蛋白表达谱的差异进行分析，旨在为揭示灌浆期光期高温和 暗期高温胁迫下引起的水稻籽粒形成和品质变化的差异分子生态机理积累一定基 础。主要结果如下： 1．高温处理下各品种水稻籽粒都比对照灌浆速率大且成熟早，暗期高温对籽粒 鲜重的影响大于光期高温；直链淀粉的积累在灌浆前期受高温促进，而后期受高温 抑制，两种高温处理对灌浆期直链淀粉量的差异影响主要发生在灌浆早期，各品种 间差异表现不一；高温处理降低了粒重、糙米率、精米率、整精米率、直链淀粉量 和胶稠度，使垩白度增加，不同高温处理间、品种间的差异只是这些特征的变化幅 度不同，其中整精米率和垩白度的变化幅度较大；与光期高温相比，暗期高温对粒 重和精米率的影响较大，对整精米率的影响较小；两种高温处理对糙米率、垩白度 和直链淀粉含量的差异影响在各品种间表现不一。， 2．用双向电泳技术对不同灌浆时期不同高温处理下籽粒的蛋白表达谱进行分 析，确定了81个高温处理差异表达蛋白点，经质谱分析后成功鉴定出66个差异蛋 白，将其按功能分成8类：碳水化合物代谢、氨基酸代谢、胁迫与防御蛋白、信号 转导、蛋白合成与定位、多功能、功能未知和其它分类蛋白；同时对这66个差异表 达蛋白点响应不同高温处理的表达变化进行了分析，暗期高温和光期高温间呈现出 华中农业大学20ll届博士研究生学位论文5种不同的蛋白表达变化类型；不同品种中，暗期高温和光期高温间的差异表达蛋 华中农业大学20ll届博士研究生学位论文 5种不同的蛋白表达变化类型；不同品种中，暗期高温和光期高温间的差异表达蛋 白的变化类型具有相同点和特异性。 3．在成功鉴定的所有蛋白中，11个蛋白质拥有2．5个同源异构体，对它们在两 个品种的4个灌浆阶段中的表达变化进行了分析，获得水稻籽粒中包括PPDK和支 链淀粉酶在内的同源异构体响应不同高温胁迫的动态表达谱，大部分同源异构体及 其在93 1l和特籼占两个品种间的表达变化类型不同；通过分析发现cyPPDKB同源 异构体的表达量与垩白度的大小负相关，可能由于cyPPDKB的表达量受到不同程 度的抑制而导致暗期高温和光期高温处理间垩白度的不同。 4．水稻灌浆期高温胁迫激发了水稻灌浆籽粒中包括h型硫氧还蛋白、过氧化物 氧还酶、C比nSOD、抗坏血酸过氧化物酶、热激蛋白和乙二醛酶I在内的一些胁迫 与防御蛋白的差异表达，其在光期高温和暗期高温下的表达变化类型不同；利用实 时荧光定量ImPCR对5个胁迫与防御蛋白的编码基因TⅨh、APX、2．Cys PⅨ、 C比nSOD和HSP70进行转录分析，发现大多数蛋白的蛋白水平与其转录水平的表 达变化并不一致，但可以肯定的是水稻灌浆期间参与暗期高温和光期高温抗性的分 子机制不同，在耐高温性不同的品种中发挥作用的胁迫与防御蛋白有差异。 5．在水稻籽粒品质形成中灌浆期高温适应性强的品种具有的特点为：CyPPDKB 的表达量较高，其在高温胁迫下受抑制程度较小；高温会促进各时期大部分支链淀 粉酶同源异构体的表达，并产生对光期高温和暗期高温响应较快的同源异构体；含 stress respoIlSive alplla_beta(刖B)ban．el结构域蛋白表达量较高，且同源异构体蛋白 点60在早期有表达。 本研究为揭示灌浆期光期高温和暗期高温胁迫下引起的水稻籽粒形成和品质变 化的差异分子生态机理提供了进一步研究的基本数据和线索。 关键词：水稻：灌浆；暗期高温和光期高温；稻米品质；籽粒蛋白表达谱；实时荧 光定量RT-PCR 2 光期高温与暗期高温对水稻米质和籽粒蛋白表达影响的差异研究Abstract 光期高温与暗期高温对水稻米质和籽粒蛋白表达影响的差异研究 Abs