急性肾功能衰竭及肾功对药物作用的影响.DOC

急性肾功能衰竭及肾功对药物作用的影响 肾脏是人体重要器官之一，对调节和维持人体内环境的稳定有重要作用。当各种病因引起肾脏的泌尿功能在短期内急剧下降，机体内环境将会发生严重紊乱，临床表现有尿量和尿成份的变化、氮质血症、高钾血症和代谢性酸中毒。其发病机制主要与肾血液灌流减少、肾小管阻塞、肾小管原尿返漏等因素有关。 【实验目的】 复制中毒性肾功能衰竭的动物模型。观察急性肾功能衰竭时家兔出现的各种功能代谢变化，进一步探讨急性肾功能衰竭发生的机理。 【实验原理】 用升汞引起急性肾小管坏死（ATN）复制中毒性肾病，并观察少尿期主要机能代谢变化。 【实验对象】 家兔(体重在2-2.5kg) 【器材、药品】 1%HgCl2、0.9%NaCl溶液、1%普鲁卡因、0.2%肝素钠溶液、肌酐标准应用液、苦味酸、氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、3%焦锑酸钾溶液、无水乙醇、氢氧化钙、钠标准应用液、pH 12.0磷酸盐－氢氧化钠缓冲液、724型分光光度计、离心机、恒温水筒、5ml离心管、5ml注射器、0.5ml、2ml、5ml刻度吸管、手术器械、火焰光度计、血气分析仪。 【方法步骤与观察项目】 本实验以一般状态、尿量、尿蛋白、血浆肌酐、尿肌酐、内生肌酐清除率、血浆钠、尿钠、血浆钾、滤过钠排泄分数、酚红排泄率、肾形态学观察为观察指标。 复制模型：在实验前24小时取两只家兔称重后，一只肌肉(或皮下)注射1%HgCl2(1.2ml╱kg)造成急性肾功能衰竭，另一只在相同部位注射等量的生理盐水作为正常对照。 取上述两只家兔分别称重固定于兔台上，耳缘静脉注射5%葡萄糖溶液（15ml/kg），以保证有足够的尿量。 颈部剪毛、局麻、作颈动脉插管，取血置于盛有肝素的离心管内，离心(2000rpm，15min)后取血浆以备测定血中肌酐钠浓度。 腹部剪毛、局麻，在耻骨联合上1.5cm处作腹正中切口，分离皮下组织，沿腹白线切开腹膜，暴露膀胱，抽取膀胱中的尿液以备作尿肌酐、尿钠浓度测定，分离两侧输尿管，作输尿管插管，收集1h尿液，换算成每分钟排尿量。 观察实验组及对照组家兔的一般状态、呼吸、尿量等。 P.S.P试验 1.从家兔耳缘静脉内准确快速注入酚红溶液6mg/ml，立即记时。 2.用50ml注射器抽取生理盐水30ml及20%葡萄糖20ml，由耳缘静脉注入。 3.分别于注射酚红后30分钟、1小时后收集尿量。 4.将每次收集的尿量放入500ml量筒内，加10%NaOH5ml，再加水至500ml，搅拌均匀后，从中取10ml置于标准管内径相等的试管中与标准管比色，得出不同时间内酚红排除率。 尿蛋白定性试验 将膀胱中收集的尿液取5ml置于试管中在酒精灯上加热至沸腾，待尿变混浊后加10%醋酸3-5滴，如混浊不退(或加热混浊仍不退)为蛋白定性试验阳性，按其混浊程度与下面标准判定结果，如加醋酸后尿变清，是尿中无机盐所致。 “－” 表示尿液清晰不显混浊 “＋” 尿液出现轻度白色混浊，呈白雾状(含蛋白质约0.01-0.05克%) “＋＋” 尿液呈颗粒混浊(含蛋白质约0.05-0.2克%) “＋＋＋” 尿液呈絮状混浊(含蛋白质约0.2-0.5克%) “＋＋＋＋” 尿液呈块状混浊(含蛋白质0.5克%) 应用焦锑酸钾比浊法按下表的操作测定血清和尿钠含量。 取膀胱中尿液5ml，移入含氢氧化钙的试管中，用玻璃棒搅拌混匀，放置15min后离心(2000rpm，5min)，吸取上清尿液(已除去磷酸盐类)至另一试管供作尿钠测定。 钠测定操作步骤 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 标准管(ml) 测定管(ml) ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 血清或尿滤液 --- 0.2 钠标准应用液 0.2 --- 无水乙醇 1.8 1.8 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 混和测定管离心(2000rpm，3min)后吸取上清液，标准管直接吸取，分别移入另一试管。 ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ 上清液 3%焦锑酸钾溶液 混合、静置5min后用52