弓形虫棒状体蛋白$S的原核表达及鉴定-江苏大学.PDF

第 卷第 期 江 苏 大 学 学 报医学 版 年 月 弓形虫棒状体蛋白 的原核表达及鉴定 鞠爱萍 吴亮 沈进 李礼 姜旭淦 陈盛霞 江苏大学基础医学与医学技术学院 江苏 镇江 摘要 目的 原核表达刚地弓形虫株棒状体蛋白 建立检测和定位虫体 蛋白 的方法 方法 运用技术扩增弓形虫株速殖子 基因克隆至 载体转化至大肠埃希菌 中诱导表达经染色切胶纯化重组 蛋白并制备其兔多克隆抗体 采用蛋白质印迹技术和间接免 疫荧光技术检测和定位 在弓形虫速殖子体内的表达 结果 成功表达 重组 蛋白并获得其多克隆抗体 经蛋白质印迹技术检测出虫体 特异性条带技术检测出 分布于虫体棒状体 结论 通过制备多克隆抗体利用蛋白质印迹技术和技术能检测和定位 蛋白在弓形 虫体内表达 关键词 弓形虫 棒状体蛋白 原核表达 染色 中图分类号 文献标志码 文章编号 刚地弓形虫 是一种广泛分 严重病变新生儿脑炎智力障碍甚至流产畸胎 布于世界范围内的重要的人兽共患寄生虫几乎感 死胎 目前弓形虫感染已成为 患者和器官 染所有的恒温动物人类普遍易感据统计全球约有 移植者重要的死亡因素之一 弓形虫棒状体蛋 白 人口感染弓形虫 免疫功能正常人群感染弓 是棒状体分泌的一系列 形虫后不会出现明显的临床症状仅表现为轻度流 毒力蛋 白是弓形虫入侵宿主的重要作用因 感样症状但免疫功能降低缺陷者或胎儿感染后则 子 近年来国内外学者对弓形虫棒状体蛋白 可引发严重的弓形虫病从而导致人体各器官出现 的研究取得了一定进展证明 是一个毒力 基金项目 江苏省研究生创新计划资助项目 江苏大学科技创新团队资助项目 作者简介 鞠爱萍 女硕士研究生陈盛霞通讯作者 教授博士生导师 江苏大学学报医学版第 卷 关键因子对于弓形虫入侵宿主细胞及其在细胞 基因扩增与克隆 根据 基 内的生存是十分重要的 而国内对 的研 因库中弓形虫 株基因组 基因序列用 究较少 本研究通过原核表达技术成功构建了原 软件设计 对特异性引物 上游引物 核表达载体并获得重组 为深入研究 的生物学功能及其在入侵中发挥的作用提