雄激素对颗粒细胞乳酸生成的抑制作用-南京医科大学.PDF

南京医科大学学报（自然科学版） 第38卷第7期 ·962 · ACTAUNIVERSITATISMEDICINALISNANJING（NaturalScience） 2018年7月 雄激素对颗粒细胞乳酸生成的抑制作用 朱 青，刁飞扬，马 翔，高 超，高 莉，崔毓桂，刘嘉茵* 南京医科大学第一附属医院生殖医学科，生殖医学国家重点实验室，江苏 南京 210029 ［摘 要］ 目的：观察雄激素对卵巢颗粒细胞乳酸生成的抑制作用，探讨多囊卵巢综合征（polycysticovarysyndrome，PCOS）高 雄激素状态下的颗粒细胞乳酸生成及其对卵泡发育的影响。方法：体外培养人卵巢癌颗粒细胞系KGN细胞，用不同浓度睾酮 （0.1~1000nmol/L）处理不同时间（0~48h）。测定培养上清液中乳酸含量，采用实时聚合酶链反应（real⁃timePCR）以及蛋白质 印迹法（Westernblot）分别检测细胞内乳酸脱氢酶A（LDHA）和乳酸脱氢酶B（LDHB）的mRNA及蛋白质表达水平。结果：人卵巢 颗粒细胞系KGN细胞经1000、100、1nmol/L睾酮处理24h或者1、10nmol/L睾酮处理24及36h后，其乳酸生成量显著减少 （P0.05）。并且，在100、1nmol/L睾酮处理24h后，KGN细胞内LDHA、LDHB的mRNA及蛋白质表达水平显著降低（P0.05）。 结论：较高浓度雄激素通过抑制卵巢颗粒细胞内LDHA、LDHB的表达从而降低乳酸生成，可能与PCOS卵泡发育障碍相关。 ［关键词］ 多囊卵巢综合征；高雄激素；颗粒细胞；乳酸；乳酸脱氢酶 ［中图分类号］ R71 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1007⁃4368（2018）07⁃962⁃04 doi：10.7655/NYDXBN Excessandrogeninhibitinglactateproductioningranulosacells ZhuQing，DiaoFeiyang，MaXiang，GaoChao，GaoLi，CuiYugui，LiuJiayin∗ ClinicalCenterofReproductiveMedicine，theFirstAffiliatedHospitalofNMU，StateKeyLaboratoryofReproductive Medicine，Nanjing210029，China ［Abstract］ Objective：Toobservethe negative effectofandrogenonlactateproductioninhumangranulosacells，meanwhile，to explore thefolliculardysplasiain polycysticovarysyndrome （PCOS）with hyperandrogenism influencedbythereducedlactate. Methods：Thehumangranulosacellline⁃KGNcellswereculturedinvitroandtreatedwithdifferentconcentrationsoftestosterone（10-10 -6 ⁃10 mol/L）fordifferenttime（0~48h）.Thecontentoflactateinculturesupernatantwasmeasured.ThemRNAlevelsofLDHAand LDHBwerequantifiedbyreal⁃timePCR.TheproteinexpressionofLDHAandLDHBweredetectedbyWesternblot. Results：After -6 -7 -9 -8 -9 treatedwith 10 ，10 and 10 mol/Ltestosteronefor 24h，besides，10 and 10 mol/Ltestosteronefor 24hor 36h，thecontentsof lactateinthesupernatantweresi