光度法在植物活性成分与血清白蛋白相互作用研究中的应用-营养与食品卫生学专业论文.docxVIP

摘要 摘要 ＼1㈣㈣ 摘要 本论文主要运用紫外．可见吸收光谱、荧光光谱、红外光谱及圆二色谱技术， 研究了血清白蛋白与植物活性成分相互作用的分子机制，并引入化学计量学方 法解析复杂体系的光谱数据，从定性和定量的角度探讨植物活性成分与血清白 蛋白的结合模式，为新药的设计与合成提供理论指导。 论文共分为五个部分，主要研究结果概述如下： 1．综述了药物小分子与蛋白质分子相互作用的研究现状，包括荧光光谱法、 紫外吸收光谱法、红外光谱法以及圆二色谱法在该研究领域的应用情况。 2．采用荧光光谱法、紫外光谱法以及红外光谱法研究了在生理酸度条件下 (pH=7．40)山姜素与牛血清白蛋白(BSA)的结合作用。研究表明，山姜素与BSA 相互作用形成新的复合物是导致BSA荧光猝灭的主要原因；热力学参数焓变明 和熵变丛值分别为22．10 ld·m01．1和166．04 J．mol-I．K-‘，表明二者之间的作用 力以疏水作用力为主。竞争实验，表明山姜素在BSA上的结合位点位于Domain IIA的疏水腔中，即Site I。同步荧光光谱以及红外吸收光谱研究表明山姜素能 够使BSA的构象发生变化。 3．在生理酸度下，运用荧光光谱和紫外．可见光谱法研究了白杨素、红景天 苷与人血清白蛋白(HSA)的相互作用。研究发现，这两种药物与HSA都有较强 的结合，白杨素对HSA的荧光有猝灭作用，而红景天苷的加入导致HSA荧光 增强。白杨素与HSA主要靠静电作用力结合，而氢键与范德华力是红景天苷结 合作用的主要驱动力。同步荧光光谱和三维荧光光谱研究表明，白杨素、红景 天苷与HSA结合都会引起HSA构象的变化。 4．采用荧光光谱法、紫外光谱法、红外光谱法以及圆二色谱法研究了牡荆 素与人血清白蛋白的结合作用。研究表明，静态猝灭是牡荆素导致HSA荧光猝 灭的主要原因；由求得的热力学参数，确定了二者之间的作用力是氢键和范德 华力。竞争实验，表明牡荆素在HSA上的结合位点位于Domain IIA的疏水腔中， 即Site I。同步荧光光谱、红外吸收光谱和圆二色谱研究表明，牡荆素能够使HSA 的构象发生变化。同时，研究了维生素C(VC)、维生素B2(VB2)对二者结合的扰 动。 5．在生理酸度条件下(pH=7．4)，应用荧光光谱技术研究了葛根素与HSA的 摘要相互作用。实验证明了葛根素能与HSA形成了基态复合物的静态方式猝灭HSA 摘要 相互作用。实验证明了葛根素能与HSA形成了基态复合物的静态方式猝灭HSA 体系的荧光。竞争实验选择华法林，布洛芬和洋地黄毒苷分别作为Site I，Site II， Site III位的标记药物，结果发现牡荆素在HSA上的结合位点位于Domain IIA的 疏水腔中，即Site I。同时，以华法林(Site I)、布洛芬(Site II)、洋地黄毒苷(Site III) 为荧光标记药物研究了葛根素与探针竞争结合HSA的反应，运用平行因子法 (PARAFAC)解析竞争实验的三维同步荧光光谱数据，获取荧光标记物、葛根素 和HSA．葛根素复合物在平衡时浓度变化趋势及其纯光谱，证实了葛根素结合在 HSA上的结合位点位于Domain IIA的疏水腔中，即Site I。 关键词：山姜素；白杨素；红景天苷；牡荆素；葛根素：牛血清白蛋白：人血 清白蛋白；荧光光谱：紫外．可见光谱；傅立叶红外光谱；圆二色谱；平行因子 法 AbstractIn Abstract In this thesis，the binding modes between some plant active components埘tll serum albumin were studied using different spectroscopic techniques viz．， fluorescence，IⅣ-vis absorption，Fourier transform infrared spectroscopy and circular dichroism．The application of chemometrics in analysis of three·dimensional data also had been developed，and it Can solve some problems and obtain the equilibrium concentration and pure spectra of each component in complicated biochemical system． The thesis consists of five parts and the main conclusion