褪黑素抑制低氧引起大鼠大脑皮层氨基酸递质释放生理学报.PDF

生理学报 , 1999 年 8 月 , 51 (4) , 445～448 　445 　 Acta Physiologica Sinica 褪黑素抑制低氧引起大鼠大脑皮层 氨基酸递质释放3 1 1 1 ,2 顾 　靖 　李学君 　孙凤艳 ( 1 上海医科大学基础医学院神经生物学教研室、医学神经生物学国家重点实验室 , 上海 200032 ; 2 上海生命科学研究中心 , 上海 200031) 摘 　要 　　为研究褪黑素对低氧引起大鼠大脑皮层脑片氨基酸释放变化的影响 , 利用反相高 效液相色谱结合荧光检测法 , 测定了孵育液中氨基酸类神经递质的含量。低氧条件为通入 9116 % N 和 814 % O 的混合气体。低氧30 min 时 , 大鼠大脑皮层脑片孵育液中 , 氨基酸类神经 2 2 γ 递质天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、牛磺酸和 2氨基丁酸的含量显著增加 , 其含量分 别是正常氧组的 24014 % , 33413 % , 20016 % , 21014 % , 16816 % 和 26319 % , 与正常氧组比较 P 0101 。予以褪黑素可以显著降低兴奋性氨基酸的释放 , 其中天冬氨酸和谷氨酸的含量分别是 低氧组的 5511 % 和 5710 % 。结果表明 , 褪黑素具有降低低氧所致的脑片释放兴奋性氨基酸的 作用。 关键词 : 褪黑素 ; 低氧 ; 脑片 ; 兴奋性氨基酸 学科分类号 : Q494 ; R338 ( ) 　　褪黑素 melatonin , MT 是由松果体腺分泌的一种重要激素 , 具有广泛的生物功能。近 来发现它具有强大的清除自由基的功能[1 ,2 ] , 而且 MT 对许多与自由基有关的病理过程 ( ) [3 ,4 ] 例如脑缺血 所致的损伤有对抗作用 。 ( 脑缺血可引起神经细胞释放氨基酸 , 主要是谷氨酸为代表的兴奋性氨基酸 excitatory amino acids , EAAs) , 而 EAAs 的堆积是脑缺血后神经元损伤的关键环节之一。EAAs 堆积可 以促使自由基生成增加[5 ] , 而自由基又可进一步加剧 EAAs 的积聚[6 ] 。它们之间可以相互 作用而加重缺血后的损伤。我们以前的工作观察到 , MT 可以降低低氧所致的脑损伤以及 [7 ] 自由基的生成 。在此基础上 , 本实验进一步观察了 MT 对大鼠大脑皮层脑片低氧孵育液 中氨基酸类递质含量变化的影响。 药品和试剂 　　邻苯二甲醛、四硼酸钠均为国产分析纯试剂 ; 22巯基乙酸为 Fluka 产 ( 品; 甲醇、四氢呋喃均为色谱纯, 英国 BDH 实验室产品。褪黑素为分析纯 上海化学试剂 ) 厂产品 , 由郏其庚教授提供。 大脑皮层脑片的制备 　　SD 雄性青壮年大鼠 , 体重 180～220 g , 购自上海医科大学 实验动物部。大鼠断头处死后 , 迅速取出大脑置于用 95 % O 和 5 % CO 饱和的人工脑脊