谷胱甘肽转硫止酶的制备.pptVIP

谷胱甘肽转硫酶的制备及动力学研究 ;课前思考题;谷胱甘肽转硫酶简介;兔肝匀浆液及纯化样品SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱; GST参与芳香环氧化物、过氧化物和卤化物的解毒作用，GST催化这些带有亲电中心的疏水化合物与还原型谷胱甘肽（GSH）的亲核基团GS－反应，中和它们的亲电部位，使产物水溶性增加，经过一系列代谢过程，最后产物为巯基尿酸，被排出体外，从而达到解毒目的。另外，GST还能共价或非共价地与非底物配基以及多种疏水化合物结合，具有结合蛋白的解毒功能。 ;亲和层析原理; 将一对能可逆结合和解离生物分子的一方作为配基，与具有大孔径、亲水性的固相载体相偶联，制成专一的亲和吸附剂，当被分离物随着流动相经过亲和吸附剂时，亲和吸附剂上的配基就有选择地吸附待分离物质，通过解吸附使待分离物质得以纯化。 亲和层析的优点：专一性??合，分辨率高，操作简单，通过一次性操作即可得到较高纯度的分离物质；具有浓缩作用，可以从含量很低的溶液中得到高浓度的样品；利用生物学的特异性进行分离，所以分离条件比较温和，能够很好地保持样品原有的生物学性质。;亲和层析法分离生物大分子示意图;d.;亲和层析介质的制备;; 琼脂糖凝胶：目前应用最多的是瑞典Pharmacia公司生产的Sepharose，它具有理想载体的特性，由D-半乳糖和3,6-脱水