酸诱导拥挤条件下肌红蛋白及突变体去折叠过程-物理化学学报.PDF

物理化学学报(Wuli Huaxue Xuebao) August Acta Phys. -Chim. Sin. 2013, 29 (8), 1785-1792 1785 [Article] doi: 10.3866/PKU.WHXB201305271 酸诱导拥挤条件下肌红蛋白及突变体去折叠过程 张玉姣1 唐 乾1 曹洪玉1 郑学仿1,2,* 1 2 ( 大连大学生命科学与技术学院, 辽宁大连116622; 大连大学辽宁省生物有机化学重点实验室, 辽宁大连116622) 摘要: 采用紫外-可见吸收光谱、同步荧光光谱和圆二色(CD)光谱法研究拥挤试剂葡聚糖70 (Dextran70)和聚 蔗糖70 (Ficoll70)存在条件下, 酸诱导野生型肌红蛋白Mb(WT)及其突变体Mb(D60K)的去折叠过程. 结果显 示: 在Dextran70 和Ficoll70 两种拥挤环境下, Mb(WT)的变性中点pH 值由4.25 分别降低到3.78 与3.76, 拥挤 试剂加入后增强了Mb(WT)的耐酸能力; 肌红蛋白60 位天冬氨酸(Asp)突变为赖氨酸(Lys)后, 变性中点pH 值由 4.25 降低到4.19, 耐酸性比野生型肌红蛋白有所增强, Mb(D60K)在Dextran70 和Ficoll70 两种拥挤环境下变 性中点pH 值由4.19 分别降至3.74 和3.12. 以上实验说明肌红蛋白表面氨基酸突变和拥挤试剂的添加起到了 稳定血红素微环境、芳香族氨基酸及二级结构和保护蛋白天然状态的作用. 关键词: 拥挤试剂; 酸变性; 肌红蛋白; 突变体; 光谱法 中图分类号: O641 Acid-Induced Unfolding Process of Myoglobin and Its Mutant under Macromolecular Crowding Conditions ZHANG Yu-Jiao1 TANG Qian1 CAO Hong-Yu1 ZHENG Xue-Fang1,2,* 1 ( School of Life Science and Biotechnology, Dalian University, Dalian 116622, Liaoning Province, P. R. China ; 2Liaoning Key Lab of Bio-organic Chemistry Dalian University, Dalian 116622, Liaoning Province, P. R. China) Abstract: In this paper, we studied the unfolding process of myoglobin (Mb) and its mutant Mb(D60K) induced by acid under macromolecular crowding conditions, using ultraviolet-visible absorption, synchronous fluorescence, and circular dichroism (CD) spectroscopies. The spectroscopic data showed that, with the addition of Dextra