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南方农业学报2011，42(5)：468--470
ofSouthern
Journal Agriculture
番木瓜幼叶原生质体分离研究
唐文忠L2，陆国昆s，廖芬-一，黄茂康-一，黄伟雄1，黄僚才s
(1广西农业科学院园艺研究所，南宁530007；2广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室，南宁530007；3南宁市西乡塘区心
摘要：【目的】探讨番木瓜幼叶原生质体的最佳分离条件。【方法】以20～30日龄番木瓜无菌苗幼叶为材料，对原生
质体分离过程中酶液组合、酶解时间、纯化离心速度(500—1500 m／n)进行探讨。【结果】随着酶
rpm)及离心时间(6一10
解液中纤维素酶和果胶酶含量的提高，番木瓜原生质体产量逐渐升高，而其活力逐渐降低，其中以为2．O％纤维素酶+
0．5％果胶酶组合的效果较好，解离时间以8h为宜。随着酶解液中甘露醇浓度的升高，原牛质体的产量呈现先增加后
降低的趋势，在0．55 rain的效果较
mol／L时达到最大(2．48×106爪／gFwo在悬浮纯化原生质体时，以1000rpm离心6—8
MES+O．55
好。【结论】适宜原生质体分离的酶解液为2．o％纤维素酶+o．5％果胶酶+25mmol／L mol／L甘露醇，最适酶解时
间为8h；在原生质体纯化时，使用1000 min，有利于获得产量及活力较高的原生质体。
rpm离心6。8
关键词：番木瓜；幼叶；原生质体；分离
中图分类号：5667．9 文献标识码：A
Isolationof from leavesof
protoplastyoung papaya
一 一 一 一 一
一
TANG Guo—kun3，HAOFenl”，HUANG
Wen-zhon91”，LU Mao-kan91”，
HUANG Liao-cai5
1，HUANG
Wei-xiong
(1HorticultureResearch of 530007，China；2
Institute，GuangxiAcademyAgriculturalSciences，Nanning GuangxiCrop
Genetic and XinxuStreetOfficeof District，
ImprovementBiotechnologytab，Nanning530007，China；3 NanningXixiangtang
Nanning
530007，China；5Laokouzi 530003，China)
Nanning Nauning AgroforestryTechnologyCo．Ltd．，Nanning
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