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原核表达条件优化影响中蛋白表达量的因素除载体启动子结构以外还有质粒拷贝数质粒稳定性结构密码子的偏爱性和宿主菌的生长状态等因素由于软件模拟表达可知结构和密码子的偏爱性两个影响因素不会造成表达困难所以本实验的工作主要针对载体拷贝数载体稳定和宿主菌的生长状态本实验中重组表达质粒不稳定的原因可能是对具有细胞毒性来源于源于都失去了分配功能区而天然质粒具有功能区可以保证质粒在每次细胞周期中准确的进行分离并均等的分配到子代细胞中去功能区对质粒的稳定性是不可缺少的缺少功能区的质粒在每次细胞周期中随机分配到子代细
原核表达条件优化
影响E.coli ?中蛋白表达量的因素除载体启动子结构以外，还有质粒拷贝数、质粒稳定性、mRNA结构、密码子的偏爱性和宿主菌的生长状态等因素[58]。由于Vector?NTI?suitor7.0软件模拟表达，可知mRNA结构和密码子的偏爱性两个影响因素不会造成表达困难，所以本实验的工作主要针对载体拷贝数、载体稳定和宿主菌的生长状态。
本实验中重组表达质粒PrP-pET-32a（+）不稳定的原因可能是PrP对E.coli ?BL21（DE3）具有细胞毒性。pET-32a（+）来源于pBR-322，pBR-322源于ColE1。ColE1、pBR-322?、pET-32a（+）
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