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亚热带农业研究 第6卷第4期
Research
Agriculture
Subtropical 2010年11月
龙H艮种子蛋白质组双向电泳技术的优化
蒋际谋1，刘浩2，王玲霞2，刘潇2，陈立涵2，陈伟2
摘要：为建立适用于龙眼(D／mdcarpusbnganaLour．)种子蛋白质组研究的双向电泳技术，对龙眼种子蛋白质的IEF、平衡时
间及染色方法等关键步骤进行了优化。结果显示，龙眼种子蛋白质主要分布在pH4—7范围内，采用酚抽法，在聚焦达到
50000
W·h的情况下能充分地聚焦，等电聚焦后经平衡缓冲液I还原15min，再经平衡缓冲液Ⅱ二次平衡20min，考马斯
cm
亮蓝染色，24 lPG胶条上样量为1．2mg时，在龙眼种子双向电泳图谱上检测到1000个多个蛋白点，蛋白点清晰，分辨率
较好。本研究所建立的一套适用于龙眼种子蛋白质组分析的双向电泳方法分辨率和重复性较高，重复样品图谱间的相关
系数在0．88-0．945之间。
关键词：龙眼；种子；双向电泳；蛋白质组
中图分类号：Q946-33；$667．2文献标识码：A 文章编号：1673-0925(2010)04-0275．05
oftwo-dimensional for of seed
Optimization gelelectrophoresisproteomelongan
jIANG Wei2
Ji．moul，LIUHa02，WANGLing．xia2，LIUXia02．CHENLi．hart2，CHEN
Research
(1．Fruit Institute。FujianAcademyofAFiculmmlSciences，Fuzhou，Fujian350013。China；2．College
ofLife
Sciences，Fuj汹A|峨=tIltl珊andForestryUnivemity，Fushou，Fujian350002，CUna)
ordertO for 0f
Abstract：Inestablish丑two-dimensional
gelelectrophoresis(2-DE)protocolpmteomicstudylongan(肼舢掣
the of timeandadifferentmethodof resultsshowed
l西培∽Lour．)seed，weoptimizedkeyprocessIEF。equilibrium staining．The
thatthe withinthe 0f 4—7．Proteinswe他extracted extraction
proteinspots慨distributedmainly rllJlgepH usingphenol proee-
dure．Before IPG were for15minin 11further20rain
SDS。the equilibrationbuffer，followedby
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