细胞培养常用技术.pptVIP

第一节 细胞形态结构观察技术 分辨率 分辨率指显微镜能将近邻的两个质点分辨清楚的能力，通常是用相邻两点间的距离来表示.与数值孔径的关系： D=0.61λ/NA=0.61λ/ N·sin(α/2) D为分辨率; λ为光波波长;要提高分辨率，可采取使用短波长光源、采用介质折射率高的袖浸系、增大孔径角以提高NA值等措施。 细胞的生长状态 生长良好的细胞，在显微镜下可观察到细胞透明度大，折光性强，轮廓不清。 若细胞生长状态不良，可见细胞轮廓增强，细胞折光性变弱，细胞胞质中出现空泡、脂滴和其他颗粒状物质，细胞之间空隙增大，细胞形态不规则，甚至失去原有细胞的特点，产生圆缩脱落，有时细胞表面及周围出现丝絮状物。 BMSCs Anip973 显微镜观察 相差显微镜 （phase contrast microscope） 活细胞对光线是透明的，光线通过活细胞时，波长和振幅几乎没有改变，所以用普通光镜无法看清未经染色的活细胞。 20世纪30年代 荷兰 Zernike 原理：利用光的衍射和干涉特性，把透过标本不同区域的光波的光程差转变成振幅差，使细胞内各种结构之间呈现清晰可见的明暗对比，从而使标本的各种结构变得清晰。 相差显