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课件:革兰阳性球菌ppt课件.ppt
1.3.3 检查方法------鉴定试验 (2)甘露醇发酵试验 原理:致病性葡萄球菌多能发酵甘露醇产酸,使培养基由紫色变为黄色。 方法:将三种葡萄球菌分别接种于甘露醇发酵管,35oC,18~24h 观察结果。 结果判断、解释和报告:培养基呈混浊、由紫色变为黄色为甘露醇发酵试验阳性,仍为紫色者为阴性。金黄色葡萄球菌甘露醇发酵试验为阳性,表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌为阴性。 2019 - * 1.3.3 检查方法------鉴定试验 (3)触酶试验 原理:葡萄球菌产生的触酶,能将对细菌有害的H2O2分解成无害的水和氧气。 方法:用接种环挑取普通琼脂平板上的葡萄球菌,置于洁净玻片上,滴加3% H2O2溶液1-2滴,观察结果。 结果判断、解释和报告:半分钟内产生大量气泡,为触酶试验阳性,而不产生气泡者为阴性。本试验用于鉴别葡萄球菌和链球菌,前者为阳性,后者为阴性。 2019 - * 1.3.3 检查方法------鉴定试验 (4)新生霉素敏感试验 原理:表皮葡萄球菌对新生霉素敏感,而腐生葡萄球菌则对新生霉素耐药。故该试验可用于表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌的鉴别。 方法:取待检菌均匀涂布于血琼脂平板上,再贴上含5pg/片的新生霉素纸片,35℃孵育16~20h,观察抑菌圈大小。试验时应以金黄色葡萄球菌ATCC 25923作为阳性对照,以确认纸片是否失效。 结果判断、解释和报告:抑菌圈直径≤16mm为耐药,16mm为敏感。此试验是用于鉴别表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌,前者敏感(S),后者耐药(R) 。 2019 - * 1.3.3 检查方法------鉴定试验 (5)肠毒素检测------动物试验 是测定食物中肠毒素较早采用的一种方法。 方法:标本(呕吐物、粪便、残余食物)接种高盐肉汤,37℃,24h,分离纯种,培养48h后,肉汤煮沸30min,离心,取上清液2ml注入体重500g左右的幼猫静脉或腹腔。 结果判断:4h内观察幼猫是否有呕吐、腹泻、体温升高、或死亡现象,提示有肠毒素存在的可能。 2019 - * 肠毒素检测------免疫学方法 主要有免疫扩散法、反向间接凝血试验(RPHA)、反向被动乳胶凝集试验(RPLA)、放射免疫法(RIA)、荧光免疫技术、酶联免疫吸附法(ELISA)及免疫印迹法(immuunoblotting)。 肠毒素检测------聚合酶链反应、生物传感技术 2019 - * 双向琼脂扩散法: 肠毒素抗血清 肠毒素提取液 2019 - * 1.4 细 菌 鉴 别 2019 - * 1.4.1 凝固酶试验阳性葡萄球菌的鉴别 2019 - * 1.4.2 致病性葡萄球菌的鉴定依据 1. 产生脂溶性金黄色色素 2. 血平板上菌落周围产生透明溶血环 3. 发酵甘露醇 4. 血浆凝固酶阳性 5. 耐热核酸酶阳性 6. 涂片镜检为革兰阳性葡萄状排列的球菌 7. G+Cmol%为30mol %—38mol % 2019 - * 1.4.3 注意事项 1. 污染的脓汁及粪便标本应接种高盐甘露醇琼脂平板,取分解甘露醇呈淡黄色的菌落进行鉴定。 2. 如为脑脊液或深部闭合性伤口标本,当常规培养阴性时,应考虑厌氧培养。 3. 药物治疗后,金黄色葡萄球菌易产生耐药性变异,同时也可出现生化反应、菌落特征、致病力、色素、溶血性等的变异。 4. 注意与粪链球菌及小球菌科其他菌的鉴别。 2019 - * 1.5 防治原则 治 抗菌素 药敏试验 自身菌苗 疗法 防 注意 消毒隔离 防止医源 性感染 防止耐药 性产生 注意 个人卫生 2019 - * 第二节 链球菌属 2019 - * 2.1 分类 链球菌属(Streptococcus):仅次于葡萄球菌的另一大类化脓性感染病原菌。模式种为化脓性溶血性链球菌。 根据在血平板上溶血状况分为: (1)甲型溶血性链球菌:菌落周围有1-2mm的草绿色溶血环,因此亦称为草绿色链球菌,多为条件致病菌。 (2)乙型溶血性链球菌:菌落周围有2-4mm的完全透明的溶血环,亦称为溶血性链球菌。在链球菌中该型致病性最强,常引起人和动物的多种疾病。 (3)丙型链球菌:菌落周围无溶血环,亦称不溶血性链球菌。一般不致病,常存在于乳类及动物的粪便中。 2019 - * 根据抗原构造分为A、B、C、D、E……等,共20群。 对人有致病性菌株90%属于A群。 根据对氧的需要分为需氧菌、兼性厌氧菌和厌氧菌,前两者对人有致病性,后者在特定条件下可引起人的疾病。 2019 - * 2.2 生物学特性------形态染色 链球菌固体培养物的镜下形态(革兰染色) 革兰阳性球菌,成双或短链排列。 2019 - * 链球菌在肉汤培养基中的镜
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