第六章 食品中常检病原微生物检验技术.pptVIP

章食品中常检病原微生物的检验技术 ;第一节沙门菌检验;一、沙门氏菌的生物学特性 （一）培养特性：需氧或兼性厌氧；普通营养琼脂上生长良好，菌落中等大小，无色半透明、圆形、光滑、湿润。;（二）生化特性： 大部分发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇和山梨酸产气； 一般不发酵乳糖和蔗糖，不发酵侧金盏花醇； 一般不产吲哚，V-P反应阴性； 不分解尿素，苯丙氨酸不脱氨； 三糖铁琼脂斜面常产生H2S。 ;*;（二）检验程序; 前增菌：食品样品在含有营养的非选择性培养基中增菌，使受损伤的沙门氏菌细胞恢复到稳定的生理状态。加工食品均应经过前增菌。 （选择性）增菌：此培养基允许沙门氏菌持续增菌，同时阻止大多数其他细菌的增殖。未经加工的食品不必经过前增菌而直接增菌。 选择性平板分离：采用固体选择培养基，抑制非沙门氏菌的生长，提供肉眼可见的疑似沙门氏菌纯菌落的识别。 生物化学筛选：排除大多数非沙门氏菌，也提供了沙门氏菌培养物菌属的初步鉴定。 血清学技术鉴定培养物菌种。; 注意事项 1、亚硫酸铋琼脂BS，使用注意事项：不可过度加热；使用前一天配制，且在48h内使用；倾注平板前需摇匀；不能反复溶解；平板需避光保存于室温环境。 2、一株待检菌需同时接种氰化钾试验管和氰化钾对照管各一支。两管均需滴加无菌液体石蜡覆盖液面，因为氰化钾易分解，产生氢氰酸，易挥发，影响试剂浓度。 ;第二节金黄色葡萄球菌检测;一、生物学特性（一）培养特性 金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37℃，最适生长pH7.4，干燥环境下可存活数周。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径0.5~1.0μm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10~15%NaCl肉汤中生长。;1、分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气； 2、甲基红反应阳性，V-P反应弱阳性； 3、许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。;（三）致病性; 金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，临床表现多种多样，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。 ;*;血平板18h~24h Baird—parker平板18h~24h或者45h~48h ; 注意事项 1、平板分离：在Baird-Parker平板上，菌落为圆形，直径2~3mm，颜色灰或黑色，周围有一浑浊带，在其外层有一透明圈。 2、革兰氏染色及镜检：金黄色葡萄球菌，革兰氏阳性，显微镜下呈葡萄状排列无芽胞，直径0.5~1μm。;第三节志贺菌检验;一、生物学特性 （一）培养特性： 需氧或兼性厌氧菌，最适温度37℃，pH6.4~7.8，在普通琼脂培养基和SS平板上，形成圆形、微凸、光滑湿润、无色半透明、边缘整齐、中等大小的菌落，半透明的光滑型菌落。宋氏致贺菌菌落较大，较不透明，粗燥而扁平，在SS平板上可迟缓发酵乳糖，菌落呈玫瑰红色。在肉汤中呈均匀混浊生长，无菌膜。 ;（二）生化特性 1、分解葡萄糖，产酸不产气。除宋氏致贺菌，均不发酵乳糖； 2、VP试验阴性，不分解尿素，不形成硫化氢，不能利用柠檬酸盐作为碳源； 3、不发酵侧金盏花醇、肌醇、水杨苷； 4、甲基红阳性、靛基质不定； 5、痢疾致贺菌不分解甘露醇，其它（福氏、鲍氏、宋内氏）均可分解甘露醇。　;（三）、致病性;; ;1、志贺菌属分几个群，各群有多少个血清型？ 2、志贺菌属在三糖铁尿素半固体琼脂斜面上的生化反应是什么？ 3、志贺菌四种多价血清指哪几种？;第四节致泻大肠埃希氏菌检验;（一）培养特性 1)需氧及兼性厌氧菌 2)对营养的要求不高，在普通琼脂上就生长良好，在15C-45℃范围内均可生长，但最适生长温度为37℃，最适pH为7.2-7.4。 3)在普通琼脂平板上培养24小时，可形成圆形、凸起、光滑、湿润、半透明、边缘整齐、中等大小的菌落．其菌落与沙门氏菌比较相似，但是，大肠杆菌菌落对光(45角折射)观察可见荧光。 4)在肉汤培养基中生长18-24小时变为均匀浑，而后底部出现粘性沉淀物，并伴有臭味。 ;5）在鲜血琼脂平板上生长，有些菌株可见β溶血环。 6）在远藤琼脂上长成带金属光泽的红色菌落 7）在S．S琼脂平板上多不生长，少数生长的细菌，也因发酵乳糖产酸而形成红色菌落； 8）在伊红美兰琼脂上形成紫黑色具有金属光泽的菌落 9）在麦康凯琼脂上培养24小时后孤立菌落呈红色 ;埃希氏菌在S．S琼脂平板上形成红色菌落;在麦康基培养基上