改造大肠杆菌卟啉代谢途径对重组过氧化物酶活性的影响-微生物学报.PDF

微生物学报 A cta Microbiologica Sinica 2018, 58(9): 1605-1613 /actamicrocn DOI: 10.13343/ki.wsxb Research Article 研究报告 改造大肠杆菌卟啉代谢途径对重组过氧化物酶活性的影响 黄莘，丁涛，黄非，白林含* 四川大学生命科学学院，生物资源与生态环境教育部重点实验室，四川 成都 610065 摘要：【目的】原核表达某些需辅因子的外源蛋白时往往酶活偏低，为提高酶活和减少外加辅因子的成 本，我们尝试在大肠杆菌中表达外源过氧化氢-过氧化物酶的同时提高大肠杆菌中与该酶辅因子相关的 合成代谢。【方法】本研究克隆了中度嗜盐菌Halomonas elongata DSM2581 的过氧化氢-过氧化物酶 CAT-POD (catalase-peroxidase)编码基因 katG 的 ORF ，构建原核表达载体 pET28a-katG ，实现了 CAT-POD 在大肠杆菌中的重组表达。由于 CAT-POD 活性依赖其活性中心血红素，而血卟啉是血红素的骨架，通 过构建原核表达载体 p