临床医学毕业体内稳定表达her2多表位基因b16细胞系的建立.docVIP

体内稳定表达HER2多表位基因B16细胞系的建立 姓 名： 2014年6月25日 作者：李贺，向泽敏，吴秀厕，王莉，卫红飞，万敏，王丽颖， 于永利 【摘要】 0的：建立体内稳定表达HER2多表位基因的小鼠黑色素瘤B16 细胞系。方法：利用分子克隆技术构建真核表达载体pcDNA3 GFP HER2,阳 离子脂质体介导法将其稳定转染入B16细胞，G418克隆筛选及体内传代后，流式 细胞术(FCM)分选出GFP HER2表达阳性细胞群，对该群细胞进行无G418条件 下的单克隆筛选并进行体内稳定性检测。结果：经限制性内切酶鉴定及序列分析， pcDNA3 GFP HER2构建正确；最终建立的表达HER2基因B16细胞系体内 传代后GFP HER2阳性率高于90%。结论：成功建立了体内稳定表达HER2多 表位基因的小鼠黑色素瘤细胞系，为其他体内稳定表达外源基因的转染细胞的 建立提供了借鉴。 【关键词】小鼠黑色素瘤细胞;HER2;阳离子脂质体 [Abstract ] AIM: To establish a BI6 cell line stably expressing genes encoding HER2 multi epitope peptides in vivo. METHODS: Eukaryotic expressing vector pcDNA3 GFP HER2 was con