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OFSOUTHERNAGRICULTURE2013，44(4)：545-551
南方农业学报JOURNAL
NNXAAB http：／／www．nfnyxb-cn
ISSN2095—1191；CODEN
DOI：10．39696：issn．2095—1191．2013．4．545
甘蔗B家族蔗糖磷酸合成酶基因SotSPSB的
克隆及原核表达
淼1，一，廖 青2一，李杨瑞1’2”
黄东t2．，秦翠鲜t∥，陈忠良，．一，桂意云·一，李双喜1，一，汪
(1广西农业科学院甘蔗研究所／广西甘蔗遗传改良重点实验室／农业部广西甘蔗生物技术与遗传改良重点实验室；2中国农业科学院甘蔗
研究中心；3广西农业科学院农业资源与环境研究所，南宁530007)
摘要：【目的】克隆甘蔗B家族SofSPSB基因并进行原核表达，为进一步研究甘蔗SIS酶学特性及SPS活性调控机制
奠定基础。【方法】在进化分析的基础上，通过同源克隆获得甘蔗sosPSB基因部分序列，再结合RACE技术获得全长
safva)OsSPSI基因序列，并在保守区设计一对
比对B家族中进化关系很近的玉米(Zeamays)ZmSPSI和水稻(Oryza
S06PsB基因全
引物扩增获得甘蔗B家族SPS基因(S06PSB)2330 bp
bp序列。结合5’一RACE和3-RACE技术获得3481
长cDNA序列，该序列包含一个3225bp的开放阅读框(ORF)；起始密码子(ATG)位于转录起始位点后56bp处，终止密
码子(TGA)后有一段201
Mw=118．96
SPSB基因全长cDNA序列，成功构建了SotSPSB基因原核表达载体，使其在大肠杆菌BL2l(DE3)中表达。
关键词：甘蔗；蔗糖磷酸合成酶；So岱PSB；克隆；原核表达
中图分类号：$566．1 文献标志码：A
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J1’ ● n
and orsuCr0Se
CloningproRaryoticeXPresslon phosphate
synthasegene(SoPSPSB)insugarcane
HUANG Cui-xianl·，CHEN
Dong-lian91’p，QIN Zhong-lian91一，GUIYi-yunl一，
LI Mia01一，LIAO
Shuang—xil一，WANG Qin92一，LIYang-mil2+
(1 Research of of Genetic,
Sugarcane Institute，GuangxiAcademyAgriculturalSciences／GuangxiKeyLaboratorySugarcane
of andGenetic
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