副猪嗜血杆菌ompP2基因的结构特征及其与毒力的联系ViewTableof.PDF

副副猪猪嗜嗜血血杆杆菌菌ompP2 基基因因的的结结构构特特征征及及其其与与毒毒力力的的联联系系 赵倩, 汤承, 杨发龙, 邵国青 and 岳 Citation: 中国科学: 生命科学 40, 522 (2010); doi: 10.1360/zc2010-40-6-522 View online: http://en /doi/10.1360/zc2010-40-6-522 View Table of Contents: http://en /publisher/scp/journal/SSV/40/6 Published by the 《中国科学》杂志社 中国科学: 生命科学 2010 年 第40 卷 第6 期: 522 ~ 532 SCIENTIA SINICA Vitae SCIENCE CHINA PRESS 论 文 副猪嗜血杆菌ompP2 基因的结构特征及其 与毒力的联系 ① ① ① ② ①* 赵倩 , 汤承 , 杨发龙 , 邵国青 , 岳华 ① 西南民族大学生命科学与技术学院, 动物医学四川省高校重点实验室, 成都 610041; ② 江苏省农业科学研究院, 南京 210014 * 联系人, E-mail: yhua900@ 收稿日期: 2010-04-09; 接受日期: 2010-05-12 国家科技支撑计划(批准号: 2006BAD06A08)资助项目 摘要 副猪嗜血杆菌ompP2 基因存在两种结构类型, 但其生物学意义人们还不清楚. 本实验 关键词 旨在进一步分析副猪嗜血杆菌ompP2 基因的结构特征并研究其与毒力的联系. 测序结果表明, 副猪嗜血杆菌 与参考菌株血清1, 3, 6, 7, 8, 9, 11 型相比, 19 株临床分离株及血清型2, 4, 5, 10, 12, 13, 14, 15 的 ompP2 基因 结构特征 参考菌株的ompP2 基因存在两处连续碱基缺失, 分别位于450~524 和770~844 bp 范围内, 共 碱基缺失 计100 bp 左右, 对81 株临床分离株的PCR 检测进一步证实此结果. 序列分析发现, 由于碱基 细胞毒性 的连续缺失导致ompP2 基因表面暴露环减少一个, 但却使暴露于膜外的抗原决定簇个数增加, 并且临床分离株和所有毒力参考菌株中均有一个相同的、无毒菌株所没有的膜表面抗原决定簇 VTDQ(K)ALGVGL, 提示暴露于膜外的抗原决定簇可能与毒力相关. 构建两种基因结构类型 的真核表达载体转染Marc145 细胞, 结果显示碱基缺失的血清5 型ompP2 基因编码蛋白的细 胞毒性显著强于血清11 型, 首次证明ompP2 基因结构特征与毒力的关系. 副猪嗜血杆菌病给全球养猪业造成了巨大的损 Acc. CP001321, ABK7,8]), 但是关于副猪 失, 其病原为巴斯德菌科嗜血杆菌属的副猪嗜血杆 嗜血杆菌的毒力因子目前还知之甚少[7,8]. Ruiz 等人[9] 菌(Haemophilus parasuis)[1]. 副猪嗜血杆菌除已定型 比较了健康猪鼻腔中和副猪嗜血杆菌病猪中分离的 的 15 个血清型外, 还存在相当一部分不能定型的菌 副猪嗜血杆菌外膜蛋白的 SDS图, 推测一个 株[2,3], 各血清型之间的致病力存在极大的差异. 一 36.6~3