2017双点突变对猪链球菌2型溶血素活性的影响-中国动物卫生与.PDF

2017年第34卷第 9 期 2 双点突变对猪链球菌 型溶血素活性的影响 1 1 2 2 3 3 1 2 3 刘　爽 ，张秀娟 ，张兴进 ，宫枫举 ，潘子豪 ，马　喆 ，孙学强 ， ， 1. 266032 2. （ 中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛　 ； 青岛立见诊断技术发展中心， 266114 3. 210095 山东青岛　 ； 南京农业大学，江苏南京　 ） 2 摘　要 ：猪链球菌 型作为一种人兽共患病病原，日益受到关注。而溶血素是其分泌的外毒素，是公认的重要 PCR 2 sly 463 毒力因子之一，具有良好的免疫原性。本试验通过 方法获得猪链球菌 型野生型溶血素基因 和 、 464 slym sly slym 2 双点突变的溶血素突变体基因 。将 和 克隆至表达载体，构建了 个重组载体并在大肠杆菌中 表达了野生型溶血素rSLY 和突变型溶血素rSLYm 。经过蛋白杂交试验，证明表达的rSLY 和rSLYm 与提取的 猪链球菌的天然野生型SLY 分子量完全一致。以提取的野生型SLY 为对照，通过溶血试验证明，突变型溶血 rSLYm PK15 RK13 SUVEC rSLYm 素 失去了溶血活性；通过接种 、 、 细胞单层，证明突变型溶血素 失去细胞毒性； 通过小鼠试验，证明突变型SLYm 对小鼠没有毒力。本试验通过溶血试验、细胞接种和小鼠实验，证明双点突 变灭活了野生型溶血素的溶血活性、细胞毒性和小鼠毒力。该溶血素突变体经免疫实验证实后，可作为猪链球 2 菌 型亚单位疫苗的候选抗原。 2 关键词：猪链球菌 型；溶血素 ；突变；溶血活性 ；细胞毒性 S852.65+9.5 B 1005-944X 2017 09-0087-05 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） DOI 10.3969/j.issn.1005-944X.2017.09.024 ： Influence of Double Positions Mutant of Streptococcus suis Serotype 2 Suilysin to Its Hemolytic Activity Liu Shuang1，Zhang Xiujuan1，Zhang Xingjin2 ，Gong Fengju2 ，Pan Zihao3 ， 3 1 2 3