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f“可F人学2004届硕十学位论文
f“可F人学2004届硕十学位论文 姓名:孙爱自i 论文名称:瓜尔显化曲离体培养研究
瓜尔豆花药离体培养研究
姓 名:孙爱新(蔬菜学) 导师姓名:傅振清(教授)、吕国华(教授)
摘要
关于瓜尔豆花药培养国内外尚无相关报道。鉴于此情况,本文着重研究了瓜尔 豆花药培养过程中小孢子发育时期、供体植株基因型和生长环境、培养基成分、预 处理和接种密度等因素对愈伤组织形成的影响,并对愈伤组织诱导再分化。纤了初 探,以期为后期试验奠定坚实的理论和实践基础。
合适的小孢子发育时期是花药培养成功开始的关键。本文通过研究确定花蕾纵 径作为瓜尔豆小孢子发育时期的判断指标;花蕾横径和纵横径比作为辅助指标。研 究中还发现,瓜尔豆同一花序上各花蕾的小孢子发育时期不同,相邻花蕾的小孢子 发育时期存在差异。随后的试验表明小孢子发育处于单核前中期的花药较容易形成 愈伤组织。
关于大豆的花药培养已经有许多报道。借用大豆花药培养成功的培养基进行了 瓜尔豆花药培养,结果表明MBl和SAC3较适合瓜尔豆花药培养。
将花蕾先在1~2℃低温下预处理24h后再接种培养,有利于花药愈伤组织高诱导 率的获得。NAA和2,4一D都利于瓜尔豆花药愈伤组织的形成,其中NAA效果优于
2,4一D,IBA的作用不明显。2,4一D在低浓度时促进愈伤组织形成,但高浓度(8.0mg/L) 时愈伤组织诱导率呈明显的下降趋势。NAA在4.O~8.0mg/L范围都有利于愈伤组织 形成,但此范围内差异不显著。蔗糖和葡萄糖对瓜尔豆花药培养愈伤组织形成都有 促进作用,但蔗糖效果优于葡萄糖,且以70~809/L效果最好。
大田花药较温室花药易于形成愈伤组织。在供试的五个基因型中,以SU.B3和 SU—B5愈伤组织诱导率高于其它品系。
花药接种密度为30枚时,花药愈伤组织诱导率较高于其它接种密度;pH值 5.3左右较合适;培养容器以三角瓶(50m1)和试管(15×100mm)对愈伤组织的 诱导较好,培养基中添加活性碳在0~0.49/L的范围内对花药愈伤组织形成有促进
作用,当超过此浓度后,反而抑制了愈伤组织的形成。
瓜尔豆花药愈伤组织分化研究中发现BA效果优于KT。但是BA诱导出的绿色 芽点却无法继续培养。有关这方面的研究尚须进一步深入。 关键饲:瓜尔UL(Cyamops妇tetragonoloba(L.)Taub);花药培养;愈伤组织诱导:芽
论文类型:B(应用研究)
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{l河j+人学2004腾硕士学何论上
{l河j+人学2004腾硕士学何论上 姓名:孙爱新 沦文名称:瓜尔豆花曲离佛=培养研究
Study on the Anther Culture of Guar
GRADUATE:SUN Aixing
PROFESSER:FU Zhenqing;L0 Guohua
Abstract:In this paper many factors such cytological period of microspore, pre—treatment,culture medium,genotype,sugar,vessel and growing environment of plant were studied,which influence callus induction on anther culture of guar(@am印sis
tetragonoloba(L.)Taub)+And redifferentiation of guar anther callus was studied elementarily.
It is important for anther culture that cytological period of microspore.In this trail results
showed that cytological period of microspore could be decided by length of bud,and width and specific value of length and width were helpful to make the selection.In addition,there was different cytological period of microspore flower buds growing on
assorted place on same inflorescence.Another trail showed that callus can be induced
easily anther in mononuclear prophase.
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