南开大学生命科学院生物化学课件00.ppt

生物化学课程体系 重要生物的结构与功能： 蛋白质，酶，核酸，维生素，激素 物质代谢： 生物氧化，糖代谢，脂代谢，氨基酸代谢， 核苷酸代谢 遗传信息的传递： DNA的复制、修复、重组，RNA代谢，蛋 白质合成，基因表达调控 蛋白质 氨基酸 蛋白质的结构：一级结构，二级结构，三级结构，四级结构，纤维状蛋白质的结构 蛋白质的结构和功能：一级结构与功能，空间结构与功能 蛋白质的性质及分离纯化 氨基酸 分类、结构：20种 性质：pI、Pk；鉴定反应如茚三酮反应、2.4-二 硝基氟苯（FDNB）反应、苯异硫氰酸（PITC） 分离鉴定：水解方式（酸、碱、酶）；分离方式（纸层析、薄层层析，离子交换柱层析 蛋白质的一级结构 定义、化学键（肽键） 一级结构测定 ： N-端分析： 2.4-二 硝基氟苯(FDNB，Sanger)，Edman降解，DNS法等 C-端分析：肼解法，羧肽酶法 肽链拆分：二硫键（过甲酸氧化法 ，还原法） 氨基酸序列确定（片段重叠法） ：CNBr裂解，酶解 蛋白质的二级结构 二级结构的特点、化学键（氢键） 肽平面的概念、特点、意义 二级结构的主要类型 ：α- 螺旋 、 β-折叠、β-转角 超二级结构和结构域的概念 （球状）蛋白质的三级结构 三级结构的概念、化学键（次级键：氢键 、离子键/盐键、范德华力、疏水作用；二硫键）、特点 肌红蛋白 蛋白质的四级结构 四级结构的概念、化学键（次级键）、特点 血红蛋白 纤维状蛋白质的结构 α-角蛋白 β-角蛋白 胶原蛋白 蛋白质的一级结构与功能 一级结构决定高级结：核糖核酸酶的变性复性 物种之间蛋白质的同源性：细胞色素，C进化树 一级结构相同，功能相同：肾上腺皮质激素和促黑激素 一级结构变化影响功能：分子病，镰刀型红细胞贫血 蛋白质的空间结构与功能 胰岛素 血红蛋白：协同性，二磷酸甘油酸、质子和CO2的作用（氧合曲线） 免疫球蛋白 蛋白原、酶原的激活：胰岛素胰蛋白酶原、凝血蛋白酶原 蛋白质的性质、分离纯化 蛋白质的性质：pI，变性、复性，沉淀（条件） 分离纯化：一般原则，主要方法（凝胶过滤、离子交换、亲和层析、高原液相等0 分子量测定：凝胶过滤，SDS，超离心 纯度鉴定：电泳，等电聚焦 酶 基本概念 酶催化作用的分子基础 酶催化作用机理 酶促反应动力学 双底物酶促反应机制 酶活性的调节和重要调节酶 酶的分离纯化和活力测定 基本概念 酶的概念 酶的催化特点：4特点（3假说） 分类、命名：系统、习惯命名；6大类 组成分类：简单；结合/全酶、复合酶类 （酶蛋白；辅酶 ，辅基 ） 酶催化作用的分子基础 活性部位：概念，功能部位，必需基团 酶原与酶原的激活：概念、意义；胰蛋白酶原、血液凝固的激活过程 酶催化作用机理 降低活化能 底物与酶的靠近及定向 底物的变形与诱导契合 酸碱催化 酶与底物形成共价中间体（共价催化） 金属离子催化 中间产物学说: ES 的形成降低“熵”值 溶菌酶 酶促反应动力学 酶浓度的影响 底物浓度对反应速度的影响 ：Michaelis - Menten 方程式 温度对酶促反应的影响 pH对酶促反应的影响 激活剂的影响 ：概念、种类 抑制剂的影响 :不可逆抑制作用 ；可逆抑制作用 ：竞争性抑制 ，反竞争性抑制 、非竟争抑制 双底物酶促反应机制 顺序机制：有序顺序机制，随机顺序机制 乒乓机制 酶活性的调节和重要调节酶 别构调节和别构酶： 概念：别构调节 、别构酶 、别构激活剂 、别 构抑制剂 、别构效应 、同促效应 、异促效 应 、协同效应 、别构酶的动力学曲线 别构调节的机理 ：序变模型 、齐变模型 酶的可逆共价调节 概念、类型（磷酸化和去磷酸化） 同工酶： 概念，乳酸脱氢酶（作用、结构、分布、意义） 酶的分离纯化和活力测定 酶分离纯化的一般原则 酶活力与测定 酶活力单位 、酶活力单位 、转换数 测定酶活力的一般方法 回收率和纯化倍数 核酸 碱基、核苷和核苷酸 磷酸二酯键与多核苷酸 DNA 的结构 RNA的种类和结构 核酸的变性, 复性和杂交 核酸的化学反应 核酸酶和DNA限制性内切酶 碱基、核苷和核苷酸 结构种类 核苷酸的生物学功能 ：携能、通讯 、酶辅助因子 磷酸二酯键与多核苷酸 DNA 的结构 一级结构：核苷酸的顺序 二级结构：Watson-Crick DNA双螺旋结构特点，A型、 Z型 三级结构 ：超螺旋结构 RNA的种类和结构 核酸的变性, 复性和杂交 变性、复性的概念，条件，现象，动力学特征 杂交的概念及应用 核酸的化学反应 核酸的化学反应 与嵌合剂的反应 脱