微生物学通报禽大肠杆菌肠炎鼠伤寒鸡白痢及鸡伤寒-微生物学报.PDF

微生物学通报 Apr. 20, 2019, 46(4): 960−966 Microbiology China DOI: 10.13344/j.microbiol.china.180269 tongbao@ /wswxtbcn 生物实验室 禽大肠杆菌、肠炎、鼠伤寒、鸡白痢及鸡伤寒沙门菌多重 PCR 方法的建立及应用 1,2 2 2 2 2 2 *1 *2 梁华 王少辉 吴晓君 许漩 田明星 丁铲 张焕容 于圣青 1 西南民族大学生命科学与技术学院 四川 成都 610041 2 中国农业科学院上海兽医研究所 上海 200241 摘 要：【背景】大肠杆菌病和沙门菌病是最常见的家禽细菌性疾病，给养禽业造成严重经济损失。 另外，禽大肠杆菌和沙门菌也是重要的人畜共患病原菌，可通过禽类及其产品传播给人类，对人类 健康造成严重威胁。加强禽大肠杆菌和沙门菌的快速鉴别检测，对养禽业和公共卫生都具有重要意 义。【目的】建立禽大肠杆菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、鸡白痢沙门菌和鸡伤寒沙门菌的多重 PCR 检测方法。【方法】通过比较分析确定禽致病性大肠杆菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、鸡白 痢沙门菌和鸡伤寒沙门菌的特异靶标基因，设计5 对特异性引物，通过条件优化建立多重PCR 方法， 分析该多重 PCR 方法的特异性、敏感性及可靠性。【结果】该方法能特异性地鉴定禽致病性大肠杆 菌、肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、鸡白痢沙门菌和鸡伤寒沙门菌，每个PCR 反应的最低检出限分别 为103 CFU 细菌和100 pg 基因组DNA 。临床分离菌株检测显示，多重PCR 与传统血清学方法结果 一致。【结论】建立的多重PCR 方法能够快速鉴别禽致病性大肠杆菌和不同血清型沙门菌，对禽大 肠杆菌病和沙门菌病的流行病学调查及临床检测具有重要意义。 关键词：禽致病性大肠杆菌，沙门菌，多重PCR ，检测 Multiplex PCR assay for detection of Avian pathogenic E. coli, Salmonella enteritidis, Salmonella typhimurium, Salmonella gallinarum and Salmonella pullorum LIANG Hua1,2 WANG Shao-Hui2 WU Xiao-Jun2 XU Xuan2 TIAN Ming-Xing2 DING Chan2 ZHANG Huan-Rong*1 YU Sheng-Qing*2 1 College of Life Science and Technology, University of Southwest Nationalities, Chengdu, Sichuan 610041, China 2 Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China Abstract: [Background] Colibacillosis and salmonellosis are the most common bacterial diseases in Foundation items: National Key Research and Development Program of China (2016YFD0500800); Chinese Special Fund for Agro-scientific Research in the Public Interest (201403054); National Natural Science Foundation of China *Corresponding authors: ZHANG Huan