光合细菌3号菌株产类胡萝卜素培养基优化.docVIP

第4 1卷第1期 0 1 3年1月 河南师范大学学报(自然科学版) Journal o f Henan Normal University ( N a t u r a 1 Science E d i t i on ) Vol. 4 1 N o . 1 Jan . 2013 1000-2367 ( 0 13 ) 01-0142-04 光合细菌 3 号菌株产类胡萝卜素培养棊优化 李彦芹，吴玲玉，吴 帆，陈 娜，李春青，康现江 (河北人学生命科学学院，河北保定 0 7 1 0 0 2 ) 摘 耍：探讨了光合细菌 3 号菌株产类胡萝卜素培养基的优化以及类胡萝卜素的提取 首先对 3 号菌株的 6 0 % 蔗糖悬液进行全波长扫描，确定了 3 号菌株在 5 7 n m 波长下出现最大吸收峰，因此用 4 5 7 n m 波长卜?的 值 作为类胡萝卜素相対含量高低的指标 ■ 通过改变培养基碳源、氮源和盐度确定最佳的碳源、氮源和盐度，得出最优碳 源为蔗糖，最优氮源为硝酸钱，最适盐度为 0 . 1 %0. 利用最佳培养基培养 3 号菌株，用皂化法分离纯化类胡萝卜素，得 类胡萝卜素纯品，提取率为 0 . 0 6 m g g -1 关键词：光合细菌；培养基优化；类胡萝卜素；提取率 Q 9 3 9 . 9 A 光合细菌( Photosynthetic bacteria P S B )是一类以光作为能源、能在厌氧光照或好氧黑暗条件下利用 口然界中的有机物、硫化物、氨等作为供氢体，进行光合作用的微生物 [ 1 ] 其菌体木身无毒、无污染、营养丰 富，细胞T物质中蛋门质含量高达 6 0 % 以上，其蛋片质氨基酸全而，维生素含录丰富，同时还含有人呆的类 胡萝卜素、辅酶 Q 等牛理活性物质 [ 2 1 类胡萝卜素作为一种功能性色素，它在被用作食品和化妆品添加剂的同时，又受到医学界的 广泛瞩目 光合细菌富含各种类胡萝卜素，町以大量培养，易r提取，是一种if?常有前途的类胡另卜素 供体 另外，光合 细菌菌体蛋白又可作为饲料或菌肥加以综合利用 [ 3 ] ■ 木文通过对光合细菌 3 号菌株培养基进行优化，用优化 后的培养基培养 3 号菌株，提取类胡萝卜索，计算提取率，以期对实际生产中光合细菌的培养和类胡萝卜素 的大最生产提供一些参考和借鉴 1 材料与方法 1. 1 菌 种 微生物学实验室分离保藏的光合细菌 3 号菌株 . 2 培养基 1 号培养基：酵母膏 0 . 0 g 9 M g S 0 4 ? 7 H 2 0 0 ? 5 g 9 K 2 H P 0 4 . 0 g ,琼脂 0 . 0 g ,蒸馆水 0 0 0 mL P H 7 . 0 ~ 7 . 2 2 1 °C 灭菌 0 m i n . 2 号培养基： N a N O 3 . 0 g C II 3 C 0 0 N a 1 . 0 g M g S 0 4 ■ 7 H 2 0 0 . 1 5 g 2 H P 0 4 0?2 g N a C 1 1 . 0 g ，酵母 膏 1?0 g ，无机盐类溶液 1 0 . 0 m L ,蒸憎水 2 1 °C 灭菌 0 m i n . 无机盐类溶液的配制: F e C 1 3 ? H 2 0 5 . 0 m g C u S 0 4 ? H 2 0 0 . 0 5 m g H 3 B 0 3 . 0 m g 9 M n C 1 2 ■ H 2 0 0 . 0 5 m g Z n S O 4 ? II 2 ()1 . 0 m g ，蒸憎水 1 0 0 0 m L . 1 . 3 活菌体吸收光谱测定 光照厌氧培养物离心，生理盐水洗涤，悬浮r 0 0 g ? L _ 1 的蔗糖溶液中，用紫外町见分光光度计在 19 0 ?1 100nm 波长范围内fl描，记录其光吸收峰值 [ 4 ] : 0 1 2 - 0 7 - 3 0 基金项河北省自然科学基金( C2011201028 ) 李彦芹( 1 9 6 5 — ),女，河北满城人，河北人学副教授，主要从事微牛物学和免疫学方向研究 .1.4 培养基优化表 1 单因了优化表 碳源/( 1 . 0 g _ 1 )氮源/( . 0 g ? L _ 1 )盐度/ %o N a 2 C 0 3 N H 4 3 0 . 1 C H 3 C 0 0 N a N a N 0 3 0 . 5 柠檬酸钠尿素 1 . 0 葡萄糖谷氨酸 1?5 蔗糖 N H 4 C 1 0 . 2 ? 4 . 1 单因子优化 采用 2 号液体培养基培养 3 号 菌株，分别改变培养基的碳源，氮源及盐度（见表 1 ）, 其他成分保持不变，接种量为 1 0 % ,每组 3 个平行， 0 °C 0 0 0 L u x 厌氧培养 d ，测定 0 D 4 5 7 ,确定 3 号菌株