甲氨喋呤脂质体的制备及抗肿瘤作用研究-生物医学工程专业论文.docxVIP

北京协和医学院＆中国医学科学院硕士学位论文2．4．5光学显微镜观察脂质体 北京协和医学院＆中国医学科学院硕士学位论文 2．4．5光学显微镜观察脂质体 ～ ～ 37 2．4．6扫描电子显微镜(SEM)观察脂质体 || ～～～～ ～ 38 2．4．7脂质体包封率及药脂比测定 ～～～ ||38 2．5小结 ．． ． ． ～ ；| || ||．．．40 参考文献 ．． ～ || || ～．．．40 第三章MTX脂质体对巨噬细胞的毒性效应 ．． ～ 躬； 3．1前言 ． ～ 一～ |{|| || ．．．43 3．2实验试剂与仪器 ～ || || ．．．43 一 3．2．1细胞株 ～ || || ～ 43 3．2．2实验动物 ～ ～ 一 ～ ．．．44 3．2．3实验试剂与耗材 一 ～ ～ ～ ．．．44 3．2．4实验仪器与设备 ～ {| || ～ ．．．44 3．3实验方法 ． ～ ～ ～ ～ ．．．45 3．3．1 DiI荧光染料标记空白脂质体 一 ～ || || || ．．．45 33．2 DiI标记的脂质体中包载量的测定 ．． ～ {| 一 ～ ．．．46 33．3 L929条件培养基的制备 ～ ～ ．．．46 3．3．4骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)的培养 ～ |；|| ；||i ～ ．．．46 3．3．5酸性磷酸酶法鉴定骨髓来源的巨噬细胞(BMDM) ～ ～ ；| || ．．．47 33．6 RAW 264．7细胞培养 ． ～ ～ |； || ．．．47 3．3．7 RAW 264．7细胞生长曲线的绘制 ． ～ 一 ～ ～ ．．．48 3．3．8 BMDM和RAW 264．7细胞对DiI标记脂质体吞噬测定 ～ ～ ．．．48 3．3．9 BMDM和RAW 264．7细胞毒性测试 ． ～ ～i| ～|| || ．．．49 33．10数据处理 ．． ～ ；| 一 ～ ．．．49 3．4结果与讨论 ～ ～ ～ ～ 50 3．4．1 DiI标记脂质体包载量的测定 ．． ～ ～ || ～ 50 3．4．2 L929条件培养基与M．CSF诱导BMDM分化效果的比较 ～ ～ ～ ～ 51 3．4．3酸性磷酸酶法鉴定BMDM ～ 一 |i ～ 52 3．4．4 RAW 264．7细胞生长曲线 ． ～ ～ || ～ 52 3．4．5 BMDM和RAW 264．7对Dil标记脂质体的吞噬作用 ～ ～．．．54 3．4．6 MTX脂质体对BMDM和RAW 264．7的细胞毒性 一 一|| ；||| || 56 3．5小结 ～ || ～ ～59 参考文献 ～ ～ ～ ～ ～ 59 第四章脂质体在荷瘤小鼠的初步药动学研究 ～ 以4．1前言 一 |||| ～～ ～ 62 4．2实验试剂与仪器 ～ i| ～ 62 4．2．1细胞株 ～ |{|| ～ 62 4．2．2实验动物 ． ～ ～ ||～ ～ 62 4．2．3实验试剂与耗材 ． 一 || || ～ ．一62 4．2．4实验仪器与设备 ． ～ || |{ ～ ．．．63 4．3实验方法 ～ || || || ．．．64 4．3．1空白脂质体的制备 ． 一 |； || ～ ．．．64 4．3．2 D诹标记空白脂质体 一 ～ ～ ～ ．．．．64 4．3 3 DiR标记脂质体包载量的测定 ． ～ ；| ～ ～ ．．．．64 万方数据 北京协和医学院＆中国医学科学院硕士学位论文4．3．4 北京协和医学院＆中国医学科学院硕士学位论文 4．3．4 RPMI 1640培养基的配制 一65 4．3．5 BALB／C小鼠CT 26移植瘤模型的建立 ～65 4-3．6 3-甲基胆蒽诱导C 57 BL／6小鼠原发肿瘤模型的建立 65 4．3．7荷结肠癌BALB／C小鼠和荷3-MCA纤维肉瘤c 57 BL／6小鼠活体成像 66 4．3．8数据处理 ．66 4．4结果与讨论 ．．66 4．4．1 DiR标记脂质体包载量的测定 66 4．4．2 BALB／C小鼠CT 26结肠癌模型 一67 4．4．3 CT 26小鼠结肠癌肿瘤模型活体成像 68 4．4．4 3-甲基胆蒽诱发小鼠纤维肉瘤模型 ．．70 4．4．5 3．甲基胆蒽诱导小鼠纤维肉瘤模型活体成像 。70 4．!；，J、{!古 ． ． 7l 参考文献 72 第五章甲氨喋呤长循环脂质体的制备和对人骨肉瘤细胞的体外抗瘤活性研究 ．74 5．1前言 ．74 5．2实验试剂与仪器 ．74 5．2．1细胞株 ．74 5．2．2实验试剂与耗材 75 5．2．3实验仪器与设备 ．75 5．3实验方法 ．76 5．3．1甲氨蝶呤长循环脂质体的制备 ．．76 5．3．2葡聚糖凝胶微柱的制备 ．76 5．3．3脂质体的纯化 ．76 5．3．4浊度法测定脂质体回收率 76 5．3．5脂质体