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IMAU, Huo XW * * 高等植物遗传转化系统 The System for Plant Gene Manipulation 第六讲 缺点： 目前对植物病毒分子生物学研究十分初浅，还不能建立有效遗传转化体系。迄今为止，植物病毒载体尚未发展到可以广泛使用的阶段。 重组双子座病毒载体系统感染植物示意图 DNA B DNA A 细胞间传递 外壳蛋白基因及复制 NPT II LB RB 外壳蛋白基因 DNA A-NPT II 双元表达载体 农杆菌 注射 叶片组织产生kan抗性 三周后 高等植物细胞直接转化法 基因枪转化法 电击法 生殖细胞原位转化法（花粉管通道法） 显微注射法 激光微束穿刺法 PEG介导法（化学共培法） 一 基因枪转化法 又称微弹射击法、粒子轰击法、高速粒子喷射技术、弹道微靶点射击，将载有外源DNA的金属（钨或金）经驱动后通过真空小室进入靶组织的一种遗传转化技术。 采用的基因枪分为火药引爆、高压放电、压缩气体等。 1987年美国康奈尔大学的Sanford首次用于植物遗传转化。可用受体范围广泛，单、双子叶植物均可，许多单子叶植物遗传转化的主要方法。 基因枪价格昂贵，转化成本较高，轰击过程对细胞损害较大，转化效率有待进一步提高。 三 生殖细胞原位转化法 植物生殖细胞指雌雄配子体中形成的或参与生殖过程的有关细胞，如大小孢母细胞、卵细胞与花粉。