透明质酸的分子量和分子结构检测.PDF

上海则人测试技术中心 Shanghai ZR Central Analytical Co. 透明质酸的分子量和分子结构检测 透明质酸（Hyaluronic acid、HA）又 名玻尿 酸，是一种酸性粘多糖。透明质酸以 其独特 的分子结构和理化性质在机体内显示 出多种 重要的生理功能，如润滑关节，调节 血管壁 的通透性，调节蛋白质，水电解质扩 散及运 转等。尤为重要的是，透明质酸具有 特殊的 保水作用，是目前发现的自然界中保 湿性最 好的物质，2%的纯透明质酸水溶液能 牢固地 保持98%水分。透皮肤中含有大量的透明质酸。人类皮肤成熟和老化过程也随着透明质酸的含量和新陈代 谢而变化，它可以改善皮肤营养代谢，使皮肤柔嫩、光滑、去皱、增加弹性、防止衰老，在保湿的同时又 是良好的透皮吸收促进剂。与其他营养成分配合使用，可以起到促进营养吸收的更理想效果。 对于GPC 的挑战： • HA 是一类刚性分子，粘度极高，需要极低浓度进样 – RI 灵敏度 • 分子量分布宽，从几万 - 几百万，良好的分离效果 – 色谱柱和检测条件选取 • 是否能监测到其，结构随分子量改变 – IV 特性粘度？ • 准确的得到分子量和分子结构信息 – LALS or MALS 测试条件： 1 上海则人测试技术中心 Shanghai ZR Central Analytical Co. 检测结果： 红色曲线为RI 检测器信号，蓝色曲线为粘度检测器信号，绿色曲线为光散射90 度角信号，黑色曲线为光 散射检测器7 度角信号。黑色直线为分子量随流出时间，绿色直线为分子大小Rh 随流出时间。 样品1 样品2 样品3 2 上海则人测试技术中心 Shanghai ZR Central Analytical Co. 可以看到样品的分子量有很大区别，从650K 增加到1972KDa。下面让我们看看透明质酸的分子结构随分 子量的变化。而体现这种变化最好的方式就是查看他们的Mark-Houwink 曲线。 可以看到，在几个不同分子量的HA 样品的Mark-Howink 曲线的叠加图中，其在叠加的分子量范围内重合 度很好。Mark-Houwink 曲线的斜率α 在低分子量范围为0.76，而斜率随分子量上升而下降，在高分子量 范围只有0.65。α 值主要反映分子的刚性和柔性程度，这说明HA 分子在低分子量范围内分子的刚性较 强，而随着分子量上升，整体线段的柔性程度增加。 3