家蚕凋亡相关基因BmDronc和BmBuffy的克隆鉴定及功能研究-细胞生物学专业论文.docx

ⅢY ⅢY 叭¨¨i■l_ ㈣8 Ⅲ8 川3 3 0 mml Dissertation for Doctoral Degree of Southwest University Cloning，Identification and Functional Analysis of the Apoptosis-related Gene BmDronc and BmBuffy in Bombyx mori Maj or： Cell Biology F ield： Cell GeneticsCell Engineering Sul Prof．Cheng1,5hen U Prof．Min．HUi Pan Candidate： Jin—Ye Zhang Chongqing·P．R．China April，2011 本研究主要由下列项目资助：国家重大基础研究发展计划(973计划)项目：“家蚕主 本研究主要由下列项目资助： 国家重大基础研究发展计划(973计划)项目：“家蚕主 要经济性状功能基因组与分子改良研究’’(编号： 2005CBl21000)； 国家高技术研究发展计划(863计划)项目：“家蚕功能 基因组平台技术(编号：2006AAl 0A1 1 7)； 国家自然科学基金项目：“家蚕细胞系的建立及其基因表 达谱的研究’’(编号：30771 630)和“家蚕核型多角体病毒对 两株家蚕特殊细胞系侵染差异的机制研究” (编号：： 独创性声明学位论文题目：塞蚕凋圭担差基因垦迎丝塑垦巡墟鲍忘隆鉴塞区 独创性声明 学位论文题目：塞蚕凋圭担差基因垦迎丝塑垦巡墟鲍忘隆鉴塞区 功能盈壅 本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论 文中引用他人已经发表或出版过的研究成果，文中已加了特别标注。对本研究及 学位论文撰写曾做出贡献的老师、朋友、同仁在文中作了明确说明并表示衷心感 谢。 学位论文作者：海汆寸 签字日期．灿 年衫月夕日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保 留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。 本人授权西南大学研究生院(筹)可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数 据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书，本论文：口不保密， 口保密期限至 年 月止)。 学位论文作者签名：弓务全叶 锄签≯霈泰 签字日期：^，，年彳月弓El 签字日期：为r，年6月多El 目录目录 目录 目录 目勇乏 i 摘 要 I ABSTRACT V 第一章文献综述 一1 1．1 j{既述 ．．1 1．2细胞凋亡研究进展 一1 1．2．1线虫细胞凋亡研究进展 ．．1 1．2．2哺乳动物细胞凋亡研究进展 一7 1．2．3果蝇细胞凋亡研究进展 11 1．2．4其他物种细胞凋亡研究进展 12 1．2．5家蚕细胞凋亡研究进展 ．14 第二章 引言 15 2．1研究背景 1 5 2．2研究的目的、意义及内容 15 2．3主要的技术路线 16 第三章家蚕细胞凋亡相关基因的生物信息学分析 ．．17 3．1材料与方法 17 3．1．1数据库和基因序列来源 17 3．1．2分析的工具软件 一18 3．1．3主要试剂及仪器 18 3．1．4方法与步骤 22 3．2结果与分析 28 3．2．1家蚕凋亡相关基因的分析鉴定 ．28 3．2．2家蚕凋亡相关基因主要家族 37 3．2．3家蚕凋亡相关基因在家蚕中的表达模式 45 3．3讨论 47 3．3．1家蚕凋亡相关基因 ．．47 3．3．2家蚕中可能存在的细胞凋亡路径 49 第四章家蚕凋亡相关基因BmDronc的克隆及功能研究 ．51 4．1材料与方法 51 4．1．1实验材料 ．5 1 4．1．2主要试剂及配制 5 1 两南大学博十学位论文4．1．3主要仪器设备 两南大学博十学位论文 4．1．3主要仪器设备 ．52 4．1．4方法与步骤 一52 4．2结果与分析 54 4．2．1家蚕凋亡相关基因BmDronc的信息分析 54 4．2．2家蚕凋亡相关基因BmDronc的克隆 55 4．2．3家蚕凋亡相关基因BmDronc的RNA水平表达检测 59 4．2．4家蚕过表达载体A4．BmDronc．pDsRed的构建 61 4．2．5家蚕凋亡相关基因BmDronc在Sf-9细胞中的异位表达 64 4．3讨论 64 第五章家蚕凋亡相关基因BmBuffy的克隆及功能研究 69 5．1材料与方法 ．．69 5．1．1材料、试剂与仪器 ．69 5．1．2方法与步骤 ．．75 5．2结果与分析 83 5．2．1家蚕凋亡相关基因BmBuffy的信息分析 ．