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生物学实验复习文档资料
生物学实验复习 yghtiger 生物学实验在考试说明中的要求 光学显微镜操作技术 生物体内物质的提取、分离与鉴定技术 生态学调查 设计实验方案 生物学新技术 (细胞工程、发酵工程、基因工程) 一、光学显微镜操作技术 1.制作临时装片 2.临时装片的染色 3.使用低倍镜、高倍镜观察玻片标本 分析显微镜操作有关的问题 (1)怎样把视野调亮、调暗? (2)怎样在低倍镜下找到物象? (3)“上”字在显微镜下观察是什么样的?如果向左下方移动装片,物象移动的方向是怎样的? (4)怎样转换高倍镜,是先升高镜筒还是直接转换高倍镜?高倍镜下的视野与低倍镜下的视野有何区别? (5)如果视野中出现污物怎样判断其位置? ①物像放大倍数=目镜放大倍数×物镜放大倍数 ②放大倍数是指放大物体的长度和宽度,而不是面积和体积。 ③视野观察到细胞的数目多少与总放大倍数成反比;而每个细胞的大小与总放大倍数成正比。 ④目镜长度与放大倍数成反比;物镜长度与放大倍数成正比。 ⑤放大倍数与镜头和盖玻片(载玻片)之间的距离成反比。 ①大光圈:光线强、视野亮,当光线过弱时需强光可使用。 ②小光圈:光线弱、视野暗,当光线过强时需弱光可使用。 ③平面镜:反射的光线较弱,当光线过强时可使用。 ④凹面镜:反射的光线较强,当光线过弱时可使用。 ⑤低倍物镜的凸透镜凸度小,且直径大,通光量大,视野明亮; ⑥高倍物镜的凸透镜凸度大,且直径大,通光量少,视野变暗。 任何需要观察的标本都要先用低倍镜观察,原因是: a.低倍镜视野相对大,便于找目标; b.易调节防止镜头与装片相碰. 高倍镜的使用方法: a.低倍镜下找到物像并移至视野中央; b.直接转动转化器,使高倍镜正对通光孔; c.调节细准焦螺旋至物像清晰 例题1:某同学用显微镜观察装片时,见视野中有甲、乙、丙三异物。为判断异物的位置,他先转动目镜,见甲异物动,然后转换物镜,三异物仍然存在。据此,三异物可能在 A、目镜上 B、物镜上 C、反光镜上 D、装片上 2.玻片标本的制作 玻片标本的制作可包括:装片法、压片法、涂片法和切片法。 ①装片法是将某些微小的生物、人的口腔上皮细胞、植物的叶片表皮等从整体上取下,不做特殊处理而直接制成装片的方法。 如洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片的制作。 学会制作临时装片 例5.植物叶片表皮上分布有大量的气孔,气孔结构如图所示。当组成气孔的细胞(保卫细胞)吸水后,会膨胀变形,气孔开启;反之细胞失水收缩,气孔关闭。请以放置一小段时间的菠菜为材料设计一个实验,证明气孔具有开启和关闭的功能。要求写出实验材料与主要用具、实验步骤、预测实验结果并作出解释。 实验材料与主要用具: 实验步骤: 预测实验结果并作出解释: 实验步骤:①取菠菜叶,用镊子剥取表皮。②在载玻片上滴一滴清水,将表皮放入清水中,盖上盖玻片,制成临时装片。③将临时装片放在显微镜载物台上,先在低倍镜下找到气孔,移动到视野中央。再换高倍镜进行观察,记录观察到的气孔状态。 ④在盖玻片的一侧滴上浓盐水,在另一侧用吸水纸吸取盖玻片下的液体,反复做几 次。 ⑤继续观察气孔的变化,并做记录。 预测实验结果并作出解释: 在清水中气孔应开启。因为当细胞液浓度大于细胞外溶液浓度时,保卫细胞吸水膨胀变形,气孔开启。 在浓盐水中气孔应关闭。因为当细胞液浓度小于细胞外溶液浓度时,保卫细胞失水收缩,气孔关闭。 ②压片法是将比较疏松的生物材料,如花药、根尖等用较小的压力压碎在载玻片上使其成一薄层的制片方法,是进行细胞学研究的常用方法之一。 如洋葱根尖细胞的有丝分裂 压片的一般过程是: a.取材; b.固定; c.解离(对不易分散的材料用HCl处理); d.漂洗; e.染色; f.压片; g.观察。 ③涂片法是一种将游离的细胞、组织均匀地涂布在载玻片上的一种制片方法,其材料有单细胞生物、小型群体藻类、血液、含有细菌的培养液等。 血液涂片的制作使用的就是涂片法。 ④切片法是用刀片将欲观察的材料切成极薄的片,以用于显微镜观察生物组织结构的一种方法。 切片法又可分为徒手切片法、石腊切片法等。 徒手切片法即用手拿刀片(或剃刀)把新鲜材料切成薄片,经简单染色后(也可不染色),封存于水中即可进行的一种方法。 如花生种子中脂肪的鉴定即使用了徒手切片法。 1.淀粉、还原糖、脂肪、蛋白质和DNA的鉴定 2.叶绿体中色素的提取和分离 3.DNA的粗提取 例题:分别在A、B、C三个研钵中家2克剪碎的新鲜菠菜绿叶,并按下表所示添加试剂,经研磨、过滤得
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