加减三甲散对肝纤维化大鼠肝功能及肝纤维化指标影响的实验研究-中医临床基础专业论文.docxVIP

成都中医药大学硕士学位论文 成都中医药大学硕士学位论文 万方数据 万方数据 摘要 目的 观察免疫性肝纤维化模型大鼠的肝功能及肝纤维化血清学变化，从实验研究 的角度验证透邪通络法治疗肝纤维化的有效性。 方法 雄性健康清洁级 wistar 大鼠 104 只随机分组成正常对照组（24 只）、病理 模型组（32 只）、透邪通络组（三甲散加减方治疗组 24 只）、阳性对照组(复方 鳖甲软肝片治疗组 24 只)，除正常对照组外其余三组均采用猪血清腹腔注射造成 免疫损伤性肝纤维化动物模型，造模的同时给予灌胃治疗。造模 12 周后用生理 盐水给予正常对照组和病理模型组灌胃治疗，透邪通络组用三甲散加减方灌胃， 阳性对照组用复方鳖甲软肝片灌胃。分别于灌胃治疗后 30 天、60 天、90 天结束 时每组取 6 只大鼠，在麻醉状态下以心脏取血方式取血后用酶联免疫法（ELISA） 检测血清肝功能及肝纤维化指标。取大鼠肝脏组织行 HE 染色后在光镜下观察。 结果 1 一般情况 正常组大鼠在整个实验过程中毛色光泽，活泼好动，饮水进食正常，体重随 着饲养时间延长规律增长。模型组大鼠在造模过程中精神状态欠佳，活动减少， 皮毛缺乏光泽，体重增长缓慢，部分大鼠体重甚至减少，实验后期少数模型组大 鼠体质虚弱死亡。透邪通络组和阳性药物组大鼠治疗前一般状况与同时期模型大 鼠一般状况相似，经过灌胃治疗后精神逐渐好转，皮毛光泽，体重随着造模灌胃 时间延长逐渐增加，比同时期正常组大鼠体重较轻。 2 病理形态 模型组大鼠肝脏表面色泽较暗，可见泥沙样小结节，体积未见明显变化，肝 脏边缘较空白组明显变钝、变厚，质地实，触之较硬、韧且不易碎。光镜下肝组 织正常结构受到破坏，肝组织均可见肝细胞发生了变性坏死以及受到炎性细胞的 侵润，可见肝细胞出现肿胀，出现脂肪样变及广泛的气球样变，肝细胞索排列紊 乱，肝脏内大量的纤维组织增生，从中央静脉到汇管区、汇管区与汇管区之间形 1 成纤维桥，连成网状，宽窄不一，肝小叶结构紊乱并被分割，大多肝小叶结构被 破坏甚至消失，部分纤维条索包裹着肝小叶，有形成假小叶的趋势，纤维间隔内 可见淋巴细胞、单核细胞侵润。 3 正常组大鼠肝功能及肝纤维化指标均未见明显异常。 三甲散加减组及复方鳖甲软肝片组的大鼠治疗 60 天后，血清肝纤维化指标 HA、LN、PⅢNP 显著降低，与模型组比较差异有显著性（P0.05），治疗 60 天后 血清 AST 水平降低，与模型组比较差异具有显著性（P0.05），到治疗 90 天后这 种差异仍然存在，其他肝功能检测未见明显差异（P0.05）。三甲散加减组与复 方鳖甲软肝片在血清肝纤维化标志物及肝功能检测中未见明显差异，无统计学意 义（P0.05）。 结论 1、腹腔注射猪血清可成功复制稳定的免疫损伤性肝纤维化动物模型。 2、三甲散加减方能改善肝纤维化大鼠的肝功能及血清肝纤维化指标，能改 善肝脏组织病理形态。 关键词：加减三甲散 主客交 肝纤维化 2 ABSTRACT Objective：Observation of the change of liver function and serum fibrosis index to validate the curative effect of touxietongluo from the Experimental Research. Methods：104 male Wistar rats were randomly divided into four groups: blank model group (24),model group (32), touxietongluo group (24,treated by modified sanjia powder decoction ) , positive control group (24, treated by fufangbiejiaruanganpian) . Except blank model group, the other 3 groups conducted by intraperitoneal injection of pig serum to estblish immune liver fibrosis model. 8 weeks after model establishment, the rats in the blank model group and model group were given saline by gavage, the rats in the touxietongluo group were given modified sanjia powder d