药物毒理学原则与注意事项-周宗灿.pptVIP

致癌物初步筛选方案结果和解释 体外基因 体内染色体畸变 突变试验 或微核试验 说 明 十 十 预测为遗传毒性致癌物 一 十 预测为遗传毒性致癌物 一 一 预测为非遗传毒性非致癌物 十 一 需进一步试验 生殖毒性 ○ 生殖毒性指对亲代雄性和雌性生殖功能的损害及对后代的有害影响。 ○ 生殖毒性可发生于妊娠前期、妊娠期和哺乳期。 ○ 生殖毒性表现为外源化学物对亲代生殖过程的影响，例如生殖器官及内分泌系统的变化，对性周期和性行为的影响，以及对生育力和妊娠结局的影响等。 发育毒性 ○发育毒性指子代在到达成体之前对诱发的任何有害影响，包括在胚期和胎期诱发或显示的影响，以及在出生后诱发和显示的影响。 ○发育毒性主要表现： (1)胚胎死亡； (2)结构异常，即畸形； 胚胎毒性 (3)生长迟缓； (4)功能缺陷。 三段 致畸试验 · 目的 ○检测受试物的致畸性 ○检测受试物的发育毒性，及其观察到有害作用的最低剂量（LOAEL）和末观察到有害作用的剂量（NOAEL） ○检测受试物的母体毒性，母体毒性是指在致畸试验中化学物引起怀孕动物的毒效应，如：行为异常、体重不增或减少。 致畸试验 · 动物和分组 ○试验用大鼠、小鼠、家兔。首选大鼠。 ○取健康、性成熟、未交配过的体重200～250g的雌性大鼠。 ○至少设4组，其中3个剂量组、阴性(溶剂)对照组，必要时设阳性对照组。每组至少12只孕鼠。 ○高剂量组剂量可用雌性动物LD50的1/10。低剂量组，可用雌性动物LD50的1/100。 ○心要时设阳性对照组，阳性对照常用敌枯双(1mg/kg体重) ，维生素A(40000IU) ，阿司匹林(300mg/kg体重) 等。 大鼠 · 致畸试验 雄鼠×雌鼠 阴栓 └┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┴┤ （天）孕0 7 ←─染毒─→ 16 20 处死检查 活胎、吸收胎、早死胎、晚死胎 ┌─────┼─────┐ 大鼠 外观畸形 骨骼畸形 内脏畸形 (3) 活胎检查。逐个记录活胎鼠性别、体重、体长、尾长。外观检查头面部、躯干部、四肢等有无外观畸形。 (4) 骨骼检查。每窝取约1/2～2/3活胎鼠，经茜素红溶液染色、透明。检查骨骼畸形，包括头骨、胸骨、脊椎骨、肋骨和四肢等有无骨化不全、迟缓和其他缺陷。 (5) 内脏检查。每窝取约1/2 ～ 1/ 3活胎鼠浸入固定液2周，作内脏检查。将胎鼠仰放石蜡板上。用刀片在头颈部常规共切5刀，再用剪刀剖开胸、腹腔，检查内脏畸形。 致畸试验 · 检查 致癌试验 判断哺乳动物致癌物的标准体内试验 ○常用大鼠、小鼠。 ○动物随机分为4组，即3个剂量组和1个对照组，每组至少雌雄各50只动物。 ○实验周期大鼠24个月、小鼠18个月。 ○主要观察肿瘤发生率、潜伏期、肿瘤组织病理学。 WHO标准 WHO(1969)提出机体可以对致癌物有下列一种或多种反应： 1. 对于对照组也出现的一种或数种肿瘤，试验组肿瘤发生率增加； 2. 试验组发生对照组没有的肿瘤类型； 3. 试验组肿瘤发生早于对照组； 4. 与对照组比较，试验组每个动物的平均肿瘤数增加。 统计学意义和生物学意义 是否有统计学意义-是否有生物学意义-是否是有害效应 ○在评价毒理学试验结果时，要综合评价实验结果的统计学意义和生物学意义 ○一般来说，具有统计学意义是具有生物学意义的必要条件之一。 ○正确地利用统计学假设检验的结果有助于确定实验结果的生物学关联。 ? 统计学意义 生物学意义 无 有 无 Ⅰ Ⅲ 有 Ⅱ Ⅳ 毒理学试验结果的统计学意义和生物学意义 在此表中，第Ⅰ和第Ⅳ种情况最为常见。 * 药物毒理学原则 及注意事项 北京大学医学部毒理学系 电话：（010药害事件 1937年美