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根据某些微生物的营养需求特点及生理生活条件,配制特定的培养基,进行该微生物的分离和纯培养。 (1)无菌技术的主要操作要求 ①对实验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒; ②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌; ———探究特定微生物的分离和纯培养——— 技法必备 1.实验原理 2.实验方法 * 第一节 微生物的分离和纯培养 课程标准 1.进行微生物的分离和培养。 2.用大肠杆菌为材料进行平板培养,分离菌落。 课标解读 1.了解有关微生物及其培养基的基础知识。 2.理解消毒和灭菌的原理、方法,进行无菌技术的操 作。 3.理解微生物接种的方法步骤,进行大肠杆菌的分离和 纯培养。 微生物主要包括_____、放线菌、 _______ 、霉菌以及立克次氏体、支原体、_____等。 (1)培养基的概念:根据微生物__________和_____的需要,将各种_________混合在一起,配制成适合微生物生存的营养基质——培养基。 微生物分离与纯培养的基本方法与原理 1.微生物的种类 2.培养基 细菌 酵母菌 病毒 生长繁殖 代谢 营养物质 (2)平板培养基 将溶化后的_____培养基基质倒入___________,_______ ___后制成的培养基称为平板培养基。 (1)接种的概念:把相应的_________移入培养基中的过程称为接种。 (2)接种的方法:在平板培养基上的接种方法有_________ ___、 ______________ 、稀释混合平板法。 (3)纯培养的概念:将所需要的微生物从_______________ ___中分离出来,获得_____微生物的过程称为纯培养。 3.接种 固体 无菌培养皿 冷却凝 研究对象 平板划线 稀释涂布平板法 混杂的微生物群 纯种 固 法 体 (1)采用无菌技术的原因与要求 ①原因:在微生物的分离和纯培养中,一定不能有______ ____________。 ②要求:在实验过程中,要对所用的器材、培养基进行严格的_____,对工作场所进行_____ 。 (2)灭菌和消毒 ①灭菌是指用强烈的_________杀死环境或物体内外_____的微生物,常用的是_________法。 ②消毒一般是用_________的理化方法杀死环境或物体上的___________和_____________________ ,常用的是_____消毒法和_________消毒法。 4.无菌技术 外来的 灭菌 消毒 理化因素 所有 高温灭菌 相对温和 病原微生物 有害微生物的营养细胞 射线 化学药剂 污染性杂菌 用酒精擦拭实验者手臂属消毒还是灭菌?70%与95%的酒精,哪一种效果更好?为什么? 提示 酒精擦拭属化学消毒。酒精消毒时,70%的酒精杀菌效果最好。原因是:浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌力减弱。 [思维激活1] (1)定义 形体微小,结构简单,通常要用光学显微镜和电子显微镜才能看清楚的生物,统称为微生物。 (2)微生物的类群 ①原核生物:细菌、放线菌、立克次氏体、支原体等。 ②部分真核生物:酵母菌、霉菌、大型真菌(如蘑菇)等。 ③非细胞结构生物:病毒、类病毒等。 (3)微生物的化学成分与营养需求 微生物的化学组成与其他生物大体相同,也是主要由C、H、O、N、P、S等大量元素和Fe、Mn、Cu、Zn、Mo等 1.微生物 微量元素组成,这些元素最终来自外界环境中各种有机物和无机物,可归纳为碳源(主要提供C元素)、氮源(主要提供N元素)、水(提供H、O)、无机盐(提供大量元素和微量元素)和生长因子五大类。 (4)代谢类型与营养物质的关系 自养型微生物和异养型微生物的营养物质比较: 营养 物质 类型 碳源 氮源 生长因子 举例 自养型 微生物 CO2、 NaHCO3 NH3、铵盐、 硝酸盐等 一般不 需要 硝化 细菌 异养型 微生物 糖类、脂 肪酸等 铵盐、 硝酸盐、 蛋白质等 有些种 类需要 乳酸菌 (1)培养基的成分 培养基中一般含有水、无机盐、碳源、氮源、生长因子五大类营养物质。 (2)碳源、氮源及生长因子的来源与功能比较 2.培养基的成分 营养成分 来源 功能 碳 源 无机碳源 CO2、NaHCO3、CaCO3等含碳无机物 ①构成细胞物质和一些代谢产物; ②有机碳源既是碳源又是能源 有机碳源 糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油、花生粉饼等 氮 源 无机氮源 无机氮:NH3、铵盐、硝酸盐、N2等 将无机氮合成含氮的代谢产物 有机氮源 牛肉膏、蛋白胨、核酸、尿素、氨基酸 合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物 生长因子 维生
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