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1.倒平板: 2.划线: 3.挑菌落 从分离的平板上单个菌落挑取少许菌苔,涂在载玻片上,在显微镜下观察细胞的个体形态,结合菌落形态特征,综合分析.如不纯,仍需平板分离法进行纯化,直至认为纯培养为止. 接种龄: 接种量: 培养基成分: 最适生长温度并不等于生长量最高时的培养温度,也不等于发酵速度最高时的培养温度或累积代谢产物量最高时的培养温度,更不等于累积某一代谢产物量最高时的培养温度. 最高:微生物生长繁殖最高温度界限,在此温度下,微生物细胞易于衰老和死亡. 最低:微生物生长繁殖最低温度界限,在此温度下,微生物生长速率很低,如果低于此温度则生长完全停止. 嗜酸微生物:乳酸杆菌、醋酸杆菌 嗜碱微生物:链霉菌 专性好氧菌:必须在有分子氧的条件下才能生长.绝大多数真菌和许多细菌都是专性好氧菌. 兼性厌氧菌:在有氧和无氧条件均能生长,但有氧情况下生长的更好,许多酵母菌和许多细菌都是.如酿酒酵母 微好氧菌:只能在较低的氧分压下才能正常生长. 耐氧菌:一类可在分子氧存在下进行厌氧生活的厌氧菌,即他们的生长不需要氧,分子氧对它也无毒害.一般的乳酸菌. 厌氧菌:分子氧对他们有毒. 1、蔬菜中的四季豆、青菜、芹菜、菠菜、韭菜、葱、茄子、胡萝卜、西红柿、黄瓜、南瓜和土豆中都含有丰富的SOD,常吃这些菜可减少氧自由基对人体的损害,延缓衰老。 2、抗氧化剂有清除氧自由基的作用,常见的抗氧化剂有维生素C、E和β-胡萝卜素,西红柿、草莓、柑桔中含有维生素C最多,而甘薯、胡萝卜和多叶绿色蔬菜富含β-胡萝卜素。 3、茶叶中的茶多酚有强大的抗氧自由基损伤组织的功能。 4、微量元素硒的抗氧化能力比维生素类高500倍,含硒丰富的食物有玉米、熟毛豆、大蒜、海带、洋葱以及肉食类等。 5、花色素有强大的抗氧化功能,能清除氧自由基。花色素普遍存在于植物的花瓣、叶子、果实、种子和水果蔬菜中。此外,葡萄酒尤其是红酒中富含大量花色素,法国人红酒的消费量最多,而心血管病的死亡率却是较低的,可能与此有关。 消毒是一种采用较温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌,而对被消毒的物体基本无害的措施。如一些常用的对皮肤、水果、饮用水进行药剂消毒的方法;对啤酒、牛奶、果汁和酱油等进行消毒处理的巴豕消毒法 \ 死亡:对微生物来说,就是不可逆 ,丧失了生长繁殖的 能力,即使再放到合适的环境中也不再繁殖。 因此在检查理化因素对微生物的致死作用时,要接种看是否生长。 高温对培养基成分的有害影响及其防止 影响:形成沉淀物;破坏营养;改变酸碱性;降低培养基浓度 防止: 采用特殊加热灭菌法 过滤除菌法 其他方法 硝酸纤维素滤膜法 离心法 三、连续培养 连续培养(continous culture of microorganisms)是在微生物的整个培养期间,通过一定的方式使微生物能以恒定的比生长速率生长并能持续生长下去的一种培养方法。 连续培养的基本原则:微生物培养过程中不断的补充营养物质和以同样的速率移出培养物 连续培养类型 恒浊连续培养 恒化连续培养 (一)恒化连续培养 在整个培养过程中通过控制培养基中某种营养物质的浓度基本恒定的方式,保持细菌的比生长速率恒定,使生长“不断”进行。 生长速率的控制因子:一般是氨基酸、氨和铵盐等氮源,或是葡萄糖、麦芽糖等碳源或者是无机盐,生长因子等物质 恒化器连续培养通常用于微生物学的研究,筛选不同的变种。 (二)恒浊连续培养 通过连续培养装置中的光电系统控制培养液中菌体浓度恒定、使细菌生长连续进行的一种培养方式。 用于菌体以及与菌体生长平行的代谢产物生产的发酵工业 (三)连续发酵与单批发酵相比 优点:缩短发酵周期,提高设备利用率; 便于自动控制; 降低动力消耗及体力劳动强度; 产品质量较稳定; 缺点:杂菌污染和菌种退化 第四节 环境因素对微生物的影响 影响因素: 氧 温 度 PH 值 (一) 温 度 根据微生物生长的最适温度不同,可以将微生物分为嗜冷、兼性嗜冷、嗜温、嗜热和超嗜热等五种不同的类型。它们都有各自的最低、最适和最高生长温度范围。 微生物类型 生长温度/℃ 最低 最适 最高 嗜冷微生物 0以下 15 20 兼性嗜冷微生物 0 20-30 35;
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