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微生物培训教材;主要内容;主要内容;1 微生物基础知识;1.1 微生物概述;1.1 微生物概述;菌落单位;1.1 微生物概述;1.1 微生物概述;1.1 微生物概述;1.1 微生物概述;1.1 微生物概述;洁净室等级划分;微生物在自然界物质循环中充当分解者。人类生活在微生物的包围之中。其与人类的关系有利有弊。 有害活动：疾病、腐败、霉变。 共生活动：微生物能为宿主提供营养；宿主为微生物提供栖身的场所。 自然界物质循环：微生物分解有机物、提高土壤的肥力、净化污水。 工农业生产上：发酵产品、酶制剂、菌肥、生物农药、生物制品、饲料、抗菌素等。 科研上：微生物是科研的掌上明珠。;微生物的益处;微生物的害处;1.2 微生物分类;1.2 微生物分类;1.3 微生物特点;微生物的生长规律;微生物的显微形态;2 微生物的形态;2.1 细菌的形态（球菌）;2.1 细菌的形态（杆菌）;2.1 细菌的形态（螺旋菌）;2.1 细菌的形态;2.2 酵母菌的形态;大多数酵母菌的菌落特征与细菌相似，但比细菌菌落大而厚，菌落表面光滑、湿润、粘稠，容易挑起，菌落质地均匀，正反面和边缘、中央部位的颜色都很均一，菌落多为乳白色，少数为红色，个别为黑色。;酵母菌与细菌的特征比较;2.2 霉菌的形态;2.3 霉菌的形态;2.3 霉菌的形态;2.3 霉菌的形态;2.4 荧光显微镜下细菌、酵母菌、霉菌的形态区分;;;;3 显微镜的使用;荧光显微镜的特点;透射式荧光显微镜 落射式荧光显微镜 ;荧光显微镜结构图;荧光显微镜的光路图;;3.2 荧光显微镜的结构;各部件介绍;分色镜 反射激发光，透过荧光 暗场聚光镜 来自下面光源的光线经过暗场聚光镜，形成 了横过显微镜视野而不进入物镜的强烈光束。 因此视野是暗的 物镜 各种物镜均可应用，但最好使用消色差的物镜 提高荧光图像的亮度，应使用镜口率大的物镜 目镜 在荧光显微镜中多用低倍目镜，如5×和6.3× ;3.3 荧光显微镜的使用说明及注意事项 ;3.3.4 载玻片、盖玻片及镜油应不含自发荧光杂质，载玻片的厚度应在0.8～1.2mm之间，太厚可吸收较多的光，并且不能使激发光在标本平面上聚焦。载玻片必须光洁，厚度均匀，无油渍或划痕。盖玻片厚度应???0.17mm左右。3.3.5 防止紫外线对眼睛的损害，在调整光源时应戴上防护眼镜。3.3.6 选用效果最好的滤光片组。 3.3.7 检查时间每次以1～2h为宜，超过90min，超高压汞灯发光强度逐渐下降，荧光减弱；标本受紫外线照射3～5min后，荧光也明显减弱；所以，最多不得超过2～3h。;3.3.8 荧光标本一般不能长久保存，若持续长时间照射（尤其是紫外线）易很快褪色。因此，如有条件则应先照相存档，再仔细观察标本。3.3.9 荧光显微镜光源寿命有限，启动高压汞灯后，不得在15min内将其关闭，一经关闭，必须待汞灯冷却后方可再开启。严禁频繁开闭，否则，会大大降低汞灯的寿命。标本应集中检查，以节省时间，保护光源。天热时，应加电扇散热降温，新换灯泡应从开始就记录使用时间。灯熄灭后欲再用时，须待灯泡充分冷却后才能点燃。一天中应避免数次点燃光源。;3.3.10 标本染色后立即观察，因时间久了荧光会逐渐减弱。若将标本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存，可延缓荧光减弱时间，防止封裱剂蒸发。? 3.3.11 若暂不观察标本时，可拉过阻光光帘阻挡光线。这样，既可避免对标本不必要的长时间照射，又减少了开闭汞灯的频率和次数。 3.3.12 荧光亮度的判断标准：一般分为四级，即“一”—无或可见微弱荧光。“+”—仅能见明确可见的荧光。“++”—可见有明亮的荧光。“+++”—可见耀眼的荧光。??;3.3.13 较长时间观察荧光标本时，一定要戴能阻挡紫外光的护目镜，加强对眼睛的保护。在未加入阻断滤光片前不要用眼直接观察，否则会损伤眼睛。 3.3.14 激发光长时间的照射，会发生荧光的衰减和淬灭现象，因此尽可能缩短观察时间，暂时不观察时，应用挡板遮盖激发光。3.3.15 作油镜观察时，应用“无荧光油”。3.3.16 荧光几乎都较弱，应在较暗的室内进行。;3.3.17 荧光图像的记录方法:荧光显微镜所看到的荧光图像具有形态学特征和荧光的颜色、亮度,判断结果时，必须将二者结合起来综合判断 记录结果：主观指标（即工作者目力观察） 客观指标（细胞分光光度计、图像分析仪等） 3.3.18 显微镜使用后的整理 观察结束，应先将镜筒升高，聚光器下降，再取下切片，然后转动转换器，使物镜与通光孔错开，做好清洁工作。清洁完毕，再下降镜筒，使两个物镜位于载物台上通光孔的两侧，呈外“八”字形，将反光镜转至与载物台垂直，