选修一专题二-微生物的培养与应用课件.ppt

统计菌落数，最好统计3个平板，计算平均值，按课本公式计算。 4、如何从平板上的菌落数推测每克样品中的菌落数？ 其中，C平均菌落数，V稀释液体积(ml)，M代表稀释倍数。 每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M 分析课本案例：两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌的数。在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。 ⑴第一位同学在该浓度下涂布了一个平板，统计菌落数为230。 ⑵第二位同学在该浓度下涂布了三个平板，统计菌落数分别为21、212和256，该同学以这三个平板的平均数163作为统计结果。 5、 你认为哪个同学的结果更接近真实值？你认为实验需 要改进吗？如何改进？ 第二位同学涂布了3个平板，1个平板的计数结果与另2个相差太远，说明操作过程中可能出现了错误。 第一位同学更接近 第一位同学只涂布了一个平板，没有设置重复组，结果不具有说服力。 改进：涂布至少3个平板。分析结果时，一定要考虑所设置的重复组的结果是否一致，结果不一致，意味着操作有误，需要重新实验。 6、统计的菌落数与真实活菌数有何关系？为什么？ 统计的菌落数往往比活菌的实际数低。因为当两个或 多个细胞连在一起时，平板上观察的只是一个菌落。 1、什么是对照实验？设置对照的主要目的是什么？ ㈢.设置对照： 对照实验是除被测试条件外，其它条件都相同的实 验。目的是排除非测试因素的影响，提高实验结果 的可信度。 2、分析实例：在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落 数目的实验时，A同学从对应的106倍稀释的培养基中 筛选出大约150个菌落，但是其他同学在同样的稀释 度下只选择出大约50个菌落。分析其原因。 ⑴土样不同 ⑵培养基污染或操作失误 (或者是混入了其他的含氮物质) 方案一：其他同学用与A同学相同土样实验 方案二：将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养。 结果预测：如果结果与A同学一致，证明A无误；如果结果不同，证明A同学有操作失误或培养基的配制有问题。 3、如何设置对照排除上述两个影响因素呢？ 结果预测：如果有菌落，被杂菌污染；如没有菌落，则无污染。 样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图 二、实验设计： 土壤中各类微生物的数量不同的 1、为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释液？ 稀释倍数 目的 细菌 104、105、106 保证获得菌落数在30～300之间、适于计数的平板 放线菌 103、104、105 真菌 102、103、104 分析教材回答： 2、培养不同的微生物时温度和时间一样吗？ 不一样 3、菌落特征有哪些？ 形状、大小、隆起程度和颜色 2、制备培养基? 牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基 （牛肉膏蛋白胨培养基作对照） 3、培养液的稀释：稀释倍数为103～107 根据流程图和三个资料设计详细实验方案： 6、细菌的计数? 当菌落数目稳定时，选取菌落数在 30～300的平板进行计数。求出平均值，计算出样 品中细菌的数目。 4、涂布平板 1、土壤取样? 5、微生物的培养与观察? 三、操作提示 1、本课题的无菌操作要注意哪些问题？ 2、做好标记 ①取土工具灭菌。 ②火焰旁操作。 3、制定计划 如果得到了2个或2个以上菌落数目在30～300的平板， 成功；如果菌落数相差较大，不成功。 2、如何判断样品的稀释操作是否成功？ 1、如何分析培养物中是否有杂菌污染及选择培养基是 否筛选出一些菌落？ 设置对照。 培养基 是否接种 预期结果 对照1 对照2 选择培养基 牛肉膏蛋白胨 接种 不接种 无菌落 菌落明显多于实验组 四、结果分析与评价 课题3 分解纤维素的微生物的分离 3、纤维素在生物圈的分布状况？ 4、纤维素酶的组成及作用？ 含量最丰富的多糖类物质。棉花、木材、作物秸秆富含纤维素。 是复合酶，有三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。 1、纤维素是构成植物细胞什么结构的主要组成成分？ 2、土壤中的某些微生物为什么能分解植物产生的纤维素？ 细胞壁。葡萄糖。 产生纤维素酶。 一、基础知识 （一）纤维素与纤维素酶 纤维素的基本组成单位是什么？ 请你设计实验来证明纤维素酶的作用。 材料用具：滤纸条 、缓冲液、纤维素酶 实验步骤： (1)取2支20mL的试管,分别放入1cm×6cm的滤纸条 。 (2)再分别加入pH为4.8，物质的量浓度为0.1 mol·L-1 的醋酸—醋酸钠缓冲液10mL、11mL。 (3)在加入lOmL缓冲液的试管中加入1mL纤维素酶。 (4)将2支试管固定在摇床上，振荡反应1ｈ。结果： 加纤维素酶的滤纸条被分解，另一支中的未分解。 则