课题3 分解纤维素的微生物的分离.pptVIP

热点考向示例 随堂达标检测 课堂互动探究 教科书问题解答 活页规范训练 课题3　分解纤维素的微生物的分离 纤维素分解菌的筛选 复合 C1酶 Cx酶 葡萄糖苷酶 C1酶、Cx酶 葡萄糖苷酶 2．纤维素分解菌的筛选 (1)筛选方法： 法。 (2)筛选原理：刚果红可以与纤维素形成 ，当纤维素被 分解后，刚果红——纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现 ，我们可以通过 来筛选纤维素分解菌。 刚果红染色 红色复合物 纤维素酶 以纤维素分解菌为中心的透明圈 是否产生透明圈 1．纤维素分解菌的筛选原理 即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 2．筛选过程中涉及的两种培养基 (1)纤维素分解菌的选择培养基 ①配方： 组分 含量/g 提供的主要营养 纤维素粉 5　 碳源、能源 NaNO3 1　 无机盐 Na2HPO4·7H2O 1.2 KH2PO4 0.9 MgSO4·7H2O 0.5 KCl 0.5 酵母膏 0.5 生长因子、碳源、氮源 水解酪素 0.5 氮源、生长因子 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL ②该培养基为液体培养基，利用液体选择培养基可增加纤维素分解菌的浓度。 (2)鉴别纤维素分解菌的培养基 ①配方： 组分 含量 提供的主要营养 CMC－Na 5～10 g 碳源 酵母膏 1 g 碳源、氮源、生长因子 KH2PO4 0.25 g 无机盐 琼脂 15 g 凝固剂 土豆汁 100 mL 碳源 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL ②此培养基为固体培养基——在其中加入刚果红可形成以纤维素分解菌为中心的透明圈，据此可筛选到纤维素分解菌。 【巩固1】 分析下面培养基的配方，请回答下面的问题。 纤维素分解菌的选择培养基： 纤维素粉　　　　　　 5 g NaNO3 1 g Na2HPO4·7H2O 1.2 g KH2PO4 0.9 g MgSO4·7H2O 0.5 g KCl 0.5 g 酵母膏 0.5 g 水解酪素 0.5 g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL。 (1)此培养基配方中为微生物提供碳源和氮源的分别是______、______。 (2)此配方为______培养基(根据物理状态)。 (3)此培养基选择出的微生物主要是_________________________。 解析　该培养基的唯一碳源是纤维素粉，氮源有NaNO3、酵母膏。因没有凝固剂成分，因此，该培养基从物理状态上看属于液体培养基。因该培养基仅以纤维素粉为唯一碳源，因此，可用于选择培养纤维素分解菌。 答案　(1)纤维素粉　NaNO3、酵母膏　(2)液体　(3)纤维素分解菌 1．分离纤维素分解菌的实验设计 (1)实验流程：土壤取样→ (此步可省略)→梯度稀释→将样品涂布到鉴别 的培养基上→挑选产生 的菌落。 (2)土壤取样 采集土样时，可以选择 的环境。 分离土壤中纤维素分解菌实验操作 选择培养 纤维素分解菌 透明圈 纤维素丰富 (3)选择培养 ①目的：增加纤维素分解菌的 ，确保能够从样品中分离到所需要的 。 ②选择培养：称取土样20 g，在无菌条件下加入装有30 mL培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在 上，在一定温度下振荡培养1～2 d，直至培养液变 。也可重复选择培养。 浓度 微生物 摇床 混浊 ③挑选菌落 a．刚果红染色法，挑选 的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。 b．常用的刚果红染色法包括两种，一种是先 ，再加入 进行 反应，另一种是在 时就加入刚果红。 产生透明圈 培养微生物 刚果红 颜色 倒平板 2．课题延伸 (1)为确定得到的透明圈中的菌落是纤维素分解菌，需要进行 的实验，纤维素酶的发酵方法有