革兰氏阴性需氧杆菌_2.pptVIP

第十一章;重要的革兰氏阴性需氧杆菌 布氏杆菌属 伯克氏菌属 假单胞菌属 波氏菌属 弗朗西斯菌属;第一节 布氏杆菌属（Brucella）;一、主要生物学特性 （一）形态及染色 球杆状或短杆状，长0.6～1.5μm，多单在。不形成芽孢和荚膜，无鞭毛不运动。革兰氏染色阴性。 柯氏染色法 布氏杆菌呈红色，其他菌呈绿色或蓝色。;布氏杆菌;（二）生长要求与培养特性 生长要求 初代分离营养要求较高，培养基中常需加入血清、血液、肝汤、葡萄糖或泛酸钙和赤藓醇等。 需氧，适温37℃，最适pH6.6～7.4。 流产布氏杆菌和绵羊布氏杆菌初代分离时尚需5％～10％CO2环境。;培养特性 初次分离时生长缓慢，需5～10d甚至20～30d才能长出菌落，但实验室传代保存的菌株，培养48～72h即可生长良好。 肝汤肉汤 呈轻微浑浊生长，无菌膜。但培养日久，可形成菌环。 血清肝汤琼脂 形成无色透明、隆起、光滑、湿润、有光泽、边缘整齐的圆形小菌落。直径0.5～1.0mm。;（三）生化反应 本菌能分解尿素，能产生硫化氢。根据不同生物型产生硫化氢的情况、脲酶作用时间和对碱性染料抑制作用的敏感性不同，可鉴别不同种型的布氏杆菌。;（四）种和生物型 ;（五）抗原性 布氏杆菌具有A和M两种表面抗原，两者的含量在不同的种型间有差异。流产布氏杆菌以A抗原为主，马尔他布氏杆菌以M抗原为主，而猪布氏杆菌两种抗原含量相近。 A抗原和M抗原分别能与相应的单相抗血清发生凝集反应。可用凝集试验鉴别两种不同的抗原。; 二、致病性 本菌致布氏杆菌病，可感染60多种动物，包括人类、各种家畜、野生哺乳动物、啮齿动物、鸟类、爬虫类、两栖类和鱼类。 细菌通过皮肤、口腔、眼结膜、阴道粘膜等部位侵入体内。 多数动物为隐性感染。 实验动物中，豚鼠最易感，小鼠和家兔也可感染。;本病特征 母畜 生殖器官和胎盘发炎，引起流产、不孕和多种组织的慢性炎症（如慢性子宫内膜炎、乳房炎、关节炎等）。 公畜 睾丸炎、副睾炎 幼畜 关节炎;流产母牛从阴道排出污灰色或棕红色有恶臭的分泌物;病母牛流产，产出发育较为完全的死胎;病牛流产，产出发育不全的胎儿，全身肿胀??有出血斑;流产的胎儿及胎衣;胎衣水肿增厚，呈胶样浸润，子叶上有出血;感染羊阴囊胀大、水肿;病公猪睾丸肿大;病猪睾丸萎缩;病猪关节肿胀; 三、微生物学诊断 布氏杆菌病常表现为慢性或隐性感染，其诊断和检疫主要依靠血清学检查及变态反应检查。 细菌学检查仅用于发生流产的动物和其他特殊情况。;（一）细菌学检查 1、病料 流产胎儿的胃内容物、胎盘、羊水、阴道分泌物、乳汁和尿液等。 2、诊断方法;（二）血清学检查 1、用已知抗体检测抗原 用已知抗体检查病料中的布氏杆菌，或鉴定分离菌是否为布氏杆菌可用： 荧光抗体技术 反向间接血凝试验 间接炭凝集试验 免疫酶组化法;2、用已知抗原检测抗体 动物感染该菌7～15d出现抗体，检测抗体是布病诊断和检疫的主要手段。 方法： 玻板凝集试验 虎红平板凝集试验 乳汁环状试验 试管凝集试验 补体结合试验;试管凝集试验 操作按检疫规程进行。 牛、马、骆驼血清凝集价1:100时判为阳性，1:50为可疑。 羊、猪、狗等血清凝集价1:50为阳性，1:25为可疑。 可疑病畜于3～4周后采血重检，如仍为可疑反应，牛、羊即可按阳性处理；猪、马则须视情况而定。;虎红平板凝集试验 取被检血清和虎红平板抗原各0.03ml，滴加于玻板上，混匀，在4～10min内出现任何程度凝集者即为阳性反应。 乳汁环状试验 为检查新鲜乳汁中抗体的方法，操作简便，准确性较高，常被用于畜群布氏杆菌病的监测。;补体结合试验 特异性和敏感性均较凝集试验高，是慢性布氏杆菌病一种可靠的诊断方法，已作为世界各国清除病畜的必要手段。 规定1:10被检血清阻止溶血在50％以上，即为阳性反应。因补体结合反应的操作方法复杂，只在特殊情况下才应用。;（三）变态反应检查 变态反应现象一般在感染后的20～25d出现，因此不宜作早期诊断。本法适合于动物的大群检疫，主要用于绵羊和山羊，其次为猪。 检测时，将布氏杆菌水解素0.2ml注射于羊尾根皱襞部或猪耳根部皮内，24及48h后各观察反应一次。若注射部发生红肿，即判为阳性反应。此法对慢性病例的检出率较高。 ;四、免疫防治 我国目前用的疫苗： M5弱毒活菌苗 可用于牛、羊和鹿布病的预防。皮下注射或气雾免疫。免疫期羊1年半，牛、鹿各为1年。 M90弱毒活菌苗 同M5弱毒活菌苗 。 S2弱毒活菌苗 可用于猪、羊、牛等动物，甚至可以接种怀孕动物而不引起流产。免疫方法采用饮水、气雾和皮下注射3种。免疫期猪为1年，牛和羊均为2年。;第二节 伯克氏菌属（Burkholderia??;一、鼻疽伯克氏菌（B.mallei） 鼻疽伯克