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抗菌试验方法 烧瓶振荡法是美国道康宁公司为克服AATCC 100试验法的缺陷而开发出的用于评价非溶出性抗菌纤维制品的一种方法。该法为增加抗菌纤维与细菌的接触机会,将试样放入盛有大量菌液的三角烧瓶中,通过长时间的激烈振荡后,比较振荡前后细菌数量的变化,从而定量地表示纤维的抗菌性。以烧瓶振荡法为基础,探讨试验条件对壳聚糖纤维抗菌性的影响,为壳聚糖纤维抗菌性的测定提供一定的参考。 试验参数的确定 1.菌悬液浓度的确定:采用分光光度计进行标定,分光光度计的波长为360nm,透光率为80%时,正好满足试验对菌悬液浓度的要求 2.肉汤含量的确定:肉汤是为细菌提供生长繁殖所需要的营养成分。实验表明1%的肉汤已经能够满足细菌生长繁殖的需要。 3.振荡时间的确定:振荡的目的是使壳聚糖抗菌试样与试验菌种能够充分接触,震荡时间一般采用1小时。 菌种的选择 由于壳聚糖纤维制品应用时是直接与人体接触的。根据人体皮肤上的常见的致病菌,选择金黄色葡萄球菌和白色念珠菌作为试验菌种,测定壳聚糖纤维的抗菌性能。 壳聚糖纤维抗菌 壳聚糖具有广谱抗菌性,对绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、酿脓链球菌有显著的抑菌作用,对一般人体表皮存在的皮肤细菌如表皮葡萄球菌,肠细菌如大肠杆菌和人体真菌如白色念珠菌,也有显著的抑菌作用。人体表皮细菌在用粉状甲壳素处理过的琼脂培养板上培养都被杀死;表皮葡萄球菌只要用0.1%或1%的甲壳素乙酸溶液处理就能全部被抑制。 壳聚糖处理织物的抗菌性 经壳聚糖处理后的纤维或织物在水洗、洗涤剂洗涤或皂洗后仍具有良好的抗菌效果。甲壳胺对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌的抗菌率为100%,经皂洗50次后,对上述三种菌的抗菌率仍为75%以上,显示出良好的抗细菌和抗真菌作用。 研究表明含少量壳聚糖的纤维素、粘胶等纤维就具有很好的抗菌性能。如含有甲壳胺0.05%~2%的腈纶纤维即使经后整理如染色、漂白或织物经洗涤、熨烫后仍然保持持久而良好的抗菌效果。 影响壳聚糖抗菌活性的因素 从微生物的角度来说,由于细菌对外界的环境比较敏感,因此影响壳聚糖纤维抗菌性的因素较多,结合微生物的特性与纺织品的应用要求,主要从试验条件、灭菌方式、染整后处理三个方面对壳聚糖纤维的抑菌率进行了分析。 1.测试条件对抗菌活性的影响 壳聚糖的抗菌性与其分子量大小有关,随壳聚糖分子量降低,对金黄色葡萄球菌抗菌性能增强。 壳聚糖的脱乙酰度对其抗菌性也有一定影响,壳聚糖的抗菌性随甲壳胺脱乙酰度的增高而增强。 当将壳聚糖纺制成纤维时,所需甲壳胺的分子量较高,一般在几十万以上,几乎超出甲壳胺的抗菌范。 pH值的影响 壳聚糖纤维的抑菌率随pH值的下降而增大,在酸性溶液中的抗菌活性较好。壳聚糖分子链上的许多游离氨基,呈现弱碱性,带负电荷的细菌就极易吸附到壳聚糖纤维上,从而使细菌的生长繁殖受到抑制。 温度的影响 温度较低时,细菌分裂速度较慢,细菌增殖较少,壳聚糖纤维的抗菌性较高;当温度升高时,细菌的繁殖速度变快,细菌数量增加,使得纤维的抗菌性反而下降37℃时细菌正处于分裂期,虽然细菌的数量增加较多,但此时细菌对外界因素包括抗菌物的作用比较敏感,更容易受到抑制,壳聚糖纤维的抗菌性反而略有升高。 光照灭菌时间的影响 光照使纤维本身所带的污染菌能够通过紫外线而被消除,以免影响试验结果。经紫外光照之后,随时间的延长,抑菌率变化不大。这说明紫外光照对纤维的抑菌性并没有影响。光照2h已足以满足试验灭菌的要求。 高压灭菌的影响 由于壳聚糖纤维在高压后会出现泛黄的现象,这一直是一个难以解决的问题,高压时采用一般的灭菌方式,即15磅高压灭菌20分钟。试验结果发现壳聚糖纤维的抗菌性并没有下降,反而稍有提高。高压灭菌后,甲壳胺的分子量会下降30%左右。因此高压后壳聚糖纤维中的部分大分子可能降解成小分子,有利于壳聚糖分子对细菌的吸附。 2.染整后处理对壳聚糖纤维抗菌性的影响 漂白 壳聚糖分子中的胺基只有在剧烈条件下能被氧化,漂白后胺基被破坏的可能性较小。但壳聚糖纤维经H2O2漂白后,壳聚糖分子的聚合度下降,使得纤维的分子量下降,容易吸附细菌到其表面上,或进入细菌的细胞内,从而影响细菌的生长繁殖或新陈代谢,导致细菌死亡。 染色 壳聚糖分子与活性染料分子之间是通过亲核取代或加成结合,结合力较强,染料分子不易从纤维上析出,但纤维表面仍有少量未固着的的染料分子,会溶于水中(染料的分子结构中也含有水溶性的磺酸基),而且活性染料本身的抗菌性较好,故纤维的抗菌性能并没有降低。 柔软整理 柔软整理时,柔软剂靠分子间力或离子键吸附于壳聚糖纤维表面,形成一层薄膜,壳聚糖分子中部分胺基被“封闭” ,导致纤维的抗菌活性降低;柔软剂能够吸附于细菌表面,降低细菌细胞的表面张力,增
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