农药进行分离与纯化的方法.pptVIP

分配柱与凝胶渗透柱层析法 分配柱层析法：把有机氯农药从极性小的农药样品中分配到极性大的溶剂中去。主要分离含脂肪、蜡质试样的有机氯。 凝胶渗透柱层析法：用凝胶sephadex LH-20作有机磷农药残留分离净化。 被纯化物质的分子量范围：有机磷200-400；色素500-900。用118g葡聚糖LH-20装柱。乙醇或丙酮淋洗；淋洗速度V=4.5ml/h。 多数有机磷（残留水平0.05—0.005ppm）淋洗体积在305—428ml；回收率可达66-98%。 薄层色谱 薄层色谱是比柱色谱更加应用广泛的分离分析手段。 薄层色谱用于分离提纯具有简单快速的特点。但是其分离容量不及柱色谱大，分离效果也不及柱色谱好。 薄层分类：吸附与分配色谱， 分配色谱又分正相色谱与反相色谱。 正相：含水吸附剂（固定相），弱极性流动相，极性小的移动快。 反相：钝化吸附剂（固定相），强极性流动相，极性强的移动快。 薄层吸附色 吸附色谱固定相：硅胶、氧化铝活化；加石膏为G型，不加为H型，加荧光剂为GF或HF 正相分配色谱固定相：纤维素或用缓冲水溶液处理过的硅胶、或用极性有机溶剂处理过的硅胶。 反相分配色谱固定相：用硅酮、石蜡等非极性溶剂处理过的硅胶或纤维素。 薄层涂层：薄层自然晾干后进行活化。 活化温度与时间： 硅胶板105-120℃，1h；氧化铝板：70℃，40min。 吸附剂选择 吸附剂 用途 吸附剂 用途 硅胶 吸附，分配 氧化铝 吸附，分配 硅藻土 分配 纤维素 分配 氢氧化钙 吸附 聚酰胺 吸附 离子交换树脂 离子交换 氧化镁 吸附，分配 吸附剂粒度的要求：5-50μm。 粒度太大推进快，影响分离；粒度太小则展开慢，出现拖尾或横向扩散过度。 制备薄层板的参数 薄层板规格：20×20cm，20×15cm，10×20cm，10×15cm，7.5×20cm，7.5×15cm，5×20cm，5×15cm。 制板：皂液洗净，烘干备用。 浆液与活化 硅胶G:水=1:2（W∶W），110-130℃，1h 氧化铝G:水=1:1—1:3 （W∶W） ，80-100℃，30min 硅藻土G:水=1:2 （W∶W） ，110℃，30min 纤维素粉:95%乙醇（丙酮）=1:5—1:6 （W∶W） ，100℃，3-5min 聚酰胺:甲醇=1:4—1:6 （W∶W） ，60-70℃，1h。 薄层板的制备 制浆：按照比例将吸附剂和相应的液体加入烧杯，搅拌均匀。 铺板：一般将均匀浆液适量倒在薄板上，两手指夹薄板两侧，旋转倾斜，让浆液在薄板上流均匀，也可以适度敲击震荡，使浆液流平。 或者将两板贴紧，插入浆液中，在提起，让多余浆液流下，一次可以制备两块板。 还有用涂布器铺板的。 薄板铺好后置平台自然晾干，活化备用。 展开剂选择 展开剂选择标准，与淋洗剂标准一致。官能团极性如下：H—＜—Cl＜—C2H5＜—CH=CH2＜—OCH3＜—NO2＜—NMe2＜—COCH3 ＜—CO2R＜＞C=O＜—CHO＜—SH＜—NH2＜—NHCOR＜—OH＜—CONH2＜—CO2H 一般单一展开剂没有很好的适合的极性，多用相容的展开剂混合，以调节展开剂极性。 被分离物质、淋洗（展开剂）及固定相的极性选择关系 用右下图指导选择展开体系。圆弧内三角形可以绕圆心转动，其三个角顶点分别指向三类物质的极性区限。如果没有适当的流动相，可以采用混合溶剂调节极性。 弧线A代表吸附剂的活性，顺箭头方向增大。 弧线B代表展开剂的极性，顺箭 头方向增大。弧线C代表被分离物 质极性，顺箭头方向增大。三角形 的三个角所指位置就是三者的关系 一般薄层色谱实验操作 实验操作环节： 点样—展开—显色—计算Rf值 点样：在距薄板下沿1cm处的水平线上毛细管的液滴与薄层表面相切，切忌玻璃管戳破薄层，可以重复点样。 展开：薄层板下沿水平插入层析缸，展开剂一定不能淹没样点，层析缸内要充满展开剂蒸汽，层析缸要盖盖子，展开剂呈水平线上升，接近薄层上沿时为止。 显色：大多数被展开物质没有颜色，要进行物理或者化学方法显色。薄层从层析缸取出，在展开剂前沿作一记号，待展开剂挥发干后显色。 物理方法：紫外灯照射；碘蒸汽熏蒸等。 化学方法：可以产生有色物质的反应。 几种点样方法 直接点点样：离下沿1.5-2.0cm处，毛细管分次点样d≤0.3 cm（凸出液滴与薄层表面相切）。 间接点样：打孔器打滤纸片2-3mm直径。试液点满滤纸片，晾干；打孔器打薄层2-3mm直径的孔，滤纸片嵌入。 制备薄层可以将试样液用打孔器打下的吸附剂吸收，干后填入孔中；也可以在薄层上挖一条沟槽，试样液用吸附剂吸收